Applicazione del sale di sodio HEPES nel kit di prova di fluorescenza e luminescenza di flusso (parte 2)

Perché scegliere il sale sodico di HEPES per il kit di citometria a flusso

Il kit di citometria a flusso ha requisiti estremamente rigorosi per il sistema tampone, e il motivo per cui il sale sodico di HEPES è diventato il tampone preferito in questo campo si basa principalmente sui seguenti vantaggi tecnici.

Intervallo di tamponamento del pH perfettamente adattato alle condizioni fisiologiche e di reazione

L'intervallo di tamponamento efficace del sale sodico di HEPES è pH 6,8-8,2, con un pKa di 7,5 (25 °C), che corrisponde perfettamente al pH fisiologico di 7,36. La reazione antigene-anticorpo e la reazione di luminescenza catalizzata da enzimi del metodo di luminescenza a fluorescenza della citometria a flusso hanno una buona attività in questo intervallo di pH. Il sale sodico di HEPES può stabilizzare il pH del sistema nell'intervallo ottimale durante tutto il processo di reazione, garantendo un'elevata efficienza di reazione.Non chelante ioni metallici per garantire l'integrità del sistema di reazioneLa citometria a flusso coinvolge molteplici passaggi di reazione biologica dipendenti da ioni metallici, come il legame antigene-anticorpo, le reazioni catalizzate da enzimi, ecc. Il sale sodico di HEPES ha una capacità di legame agli ioni metallici estremamente bassa e non chelante cofattori chiave come Mg²⁺, Ca²⁺, Mn²⁺, ecc. Al contrario, i tamponi Tris e fosfato hanno forti capacità di legame agli ioni metallici, che possono interferire con le reazioni enzimatiche dipendenti da ioni metallici. Questa caratteristica rende il sale sodico di HEPES un sostituto ideale per Tris e fosfati nella ricerca che coinvolge ioni metallici.

Elevata trasparenza ottica, non interferisce con il rilevamento della fluorescenza

Il segnale di rilevamento principale della citometria a flusso è l'intensità della fluorescenza. Il sale sodico di HEPES ha un assorbimento estremamente basso nelle regioni visibile e ultravioletta e un'elevata trasparenza ottica. Ciò significa che il sale sodico di HEPES stesso non produce fluorescenza di fondo né assorbe i segnali di fluorescenza target, garantendo un rapporto segnale-rumore di rilevamento più elevato.Forte inerzia chimica, non interferisce con la risposta immunitaria Per i produttori di kit di citometria a flusso, la qualità delle materie prime di sale sodico di HEPES influisce direttamente sulle prestazioni del kit finito. Si raccomanda di concentrarsi sui seguenti indicatori di qualità nella selezione delle materie prime:Bassa citotossicità, protegge i componenti bioattiviPer i produttori di kit di citometria a flusso, la qualità delle materie prime di sale sodico di HEPES influisce direttamente sulle prestazioni del kit finito. Si raccomanda di concentrarsi sui seguenti indicatori di qualità nella selezione delle materie prime:Suggerimenti per la selezione delle materie prime di sale sodico di HEPESPer i produttori di kit di citometria a flusso, la qualità delle materie prime di sale sodico di HEPES influisce direttamente sulle prestazioni del kit finito. Si raccomanda di concentrarsi sui seguenti indicatori di qualità nella selezione delle materie prime:indicatore di qualità

Requisiti suggeriti

Istruzioni

Contenuto principale

≥99,0%

Maggiore è la purezza, più stabile è la capacità tampone e migliore è il lotto

Solubilità in acqua

Completamente sciolto, limpido e trasparente

Garantire che la soluzione tampone sia preparata senza particelle residue