ADA Biologische buffer Veelgestelde vragen

1,Basisbegrippen van ADA-bufferingsmiddelen

V1: Wat is ADA biologische buffer?

ADA-buffer,De volledige naam isN (2-acetamido) iminodiaceenzuur,Het is een zwitterionisch organisch chemisch buffer met een effectief bufferbereik van pH 6,0-7,2 en een pKa-waarde van ongeveer 6,6 bij 25°C.

V2: Wat zijn de belangrijkste toepassingen van ADA-buffer?

ADA wordt veel gebruikt op het gebied van biochemie en moleculaire biologie.

Buffersysteem voor in vitro-diagnostische kits (zoals ELISA, detectie door laterale chromatografie)

Een pH-stabilisator voor celcultuurmedia die aan eiwitvrije media kan worden toegevoegd om de celgroei te ondersteunen

Proteïne-elektroforese en iso-elektrische focus om eiwit oxidatie en onomkeerbare denaturatie te voorkomen

Onderhoud van de pH van het enzymreactiesysteem

Buffermiddelen in kationenuitwisselingschromatografie

V3: Wat is het verschil tussen de ADA-buffer en andere buffers van Good (zoals ACES)?

ADA en ACES zijn beide buffers van Good, maar er zijn verschillen in de volgende aspecten:

ADA is bijna onoplosbaar in water, maar heeft een hoge oplosbaarheid in natriumsolen.De keuze van het buffermiddel moet volledig worden overwogen op basis van factoren zoals het specifieke pH-bereik van het experiment., metalen ioncompatibiliteit en detectiemethode.

2,Over voorbereiding en gebruik

V4: Hoe bereidt men ADA bufferoplossing voor?

Het preparaat van 0,5 M ADA bufferoplossing (pH 6.0) wordt ingenomen.6, 1L) als voorbeeld:

1Voeg ongeveer 800 ml gedeïoniseerd water toe aan de container

2Voeg 95,08 g ADA-vrijzuur toe.

3. Voeg 10N NaOH-oplossing in druppels toe onder roeren, terwijl de pH-waarde continu wordt gecontroleerd

4. Ga langzaam door met het toevoegen van NaOH totdat ADA volledig is opgelost en de pH de streefwaarde bereikt (zoals 6,6)

Het moet worden opgemerkt dat ADA-poeder niet volledig oplost in zuiver water en volledig opgelost moet worden door de pH aan te passen.22 μm filtermembraan voor sterilisatie.

V5: Wat is de typische werkconcentratie van ADA-bufferoplossing?

Voor de meeste zoogdiercellijnen wordt aanbevolen om te beginnen met een werkconcentratie van 10-25 mM.

Gewone zoogdiercellijnen (zoals HEK293, HeLa): 15-25mM

Primaire cellen en gevoelige cellijnen: 5-15 mM

De specifieke concentratie moet volgens het experimentele systeem worden geoptimaliseerd.

V6: Hoe bewaart men ADA buffer na bereiding?

ADA vaste poeder moet worden bewaard onder afgesloten omstandigheden bij kamertemperatuur, uit de buurt van licht en droog.°C. Suggesties voor de voorbereide ADA buffer oplossing:

Bewaard bij 4°C, met een houdbaarheid van ongeveer 1 jaar

Verpakking en opslag op 20°C, waardoor de opslagtijd kan worden verlengd

Vermijd herhaaldelijk bevriezen en ontdooien

3,Met betrekking tot interferentie en verenigbaarheid

V7: Zal de ADA buffer interfereren met eiwit kwantificatie experimenten?

ADA kan interfereren met de kleurgeneratie reactie in eiwit kwantificatie experimenten met behulp van BCA en Lowry methoden.Dit komt doordat de iminomodiacetinezuurgroep in de ADA-moleculaire structuur koper-ionen effectief kan chelaterenAls de BCA-methode nodig is voor de kwantitatie van eiwitten in het experiment, dan is de BCA-methode de meest geschikte methode voor het bepalen van de hoeveelheid eiwitten.het wordt aanbevolen het monster vóór de kwantificatie te vervangen door een bufferoplossing of een kwantificatiemethode te gebruiken die niet wordt beïnvloed door ADA-interferentie..

V8: Chelaat ADA metalen ionen? Waar moet ik op letten?

ADA is in staat om metalen ionen, zoals mangaan (II), koper (II), nikkel (II), zink (II), kobalt (II), enz., in een verhouding van 2 te chelaten:1Als de enzymen of eiwitten in het experimentele systeem daarom voor het handhaven van hun activiteit afhankelijk zijn van deze metaalionen, dient bij het gebruik van ADA-bufferacties voorzichtigheid te worden betracht.Voor proeven die op calcium (Ca 2) zijn gebaseerd+) of magnesium (Mg 2+In de eerste plaats is het belangrijk dat de potentiële effecten van ADA door middel van voorlopige experimenten worden geëvalueerd.

V9: Wordt de pH-waarde van ADA buffer drift of wordt de oplossing troebel?

Mogelijk, maar de kans op snelle afbraak is gering.

1Metalencomplexe neerslag: indien er hoge concentraties van bepaalde metalen ionen in de oplossing zijn, kunnen zij onoplosbare complexen met ADA vormen, waardoor troebelheid of neerslag ontstaat.die vaker voorkomt in geconcentreerde opslagoplossingen of bij gebruik van hard water

2Langzame hydrolyse: de acetylal-aminogroep in ADA-moleculen kan langzame hydrolyse ondergaan onder extreme pH-waarden (sterk zuur of sterke base) en/of langdurige hoge temperatuuromstandigheden.ontbinding tot iminodiaceenzuur en acetamide, waardoor de bufferingseigenschappen veranderen en de pH verschuift

Het wordt aanbevolen om altijd hoogzuiver water te gebruiken om bufferoplossingen te bereiden om metaalverontreiniging te voorkomen en deze onder aanbevolen omstandigheden op te slaan.

4,Wat selectie en aanbestedingen betreft

V10: Hoe kies je het juiste niveau van ADA-buffer voor je experiment?

Verschillende experimenten hebben verschillende vereisten voor de zuiverheid van ADA:

Biochemische kwaliteit (≥ 98%): geschikt voor routinebiochemische experimenten en elektroforese

Advanced Pure/Ultra Pure Grade (≥ 99%): Geschikt voor onzuiverheidsgevoelige celculturen, onderzoek naar enzymkinetiek en ontwikkeling van diagnostische reagentia

Producten met een hoge zuiverheid kunnen de verschillen tussen partijen effectief verminderen, waardoor de stabiliteit en reproduceerbaarheid van de experimentele resultaten worden gewaarborgd.

V11: Wat zijn de voordelen van ADA-bufferproducten van Hubei Xindesheng?

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. is diep betrokken geweest op het gebied vanbiologische bufferactiesHet heeft een compleet onderzoeks- en ontwikkelings-, productie- en kwaliteitscontrolesysteem voor ADA biologische buffermiddelen.De zuiverheid van de door de onderneming geproduceerde ADA-producten kan meer dan 99% bereiken., en alle technische indicatoren worden strikt vergeleken met internationale normen.Xindesheng heeft een volledig proceskwaliteitscontrolesysteem opgezet, van grondstofinspectie tot eindproductinspectie., waarbij de stabiliteit en betrouwbaarheid van elke partij producten worden gewaarborgd en aangepaste diensten kunnen worden aangeboden om aan de gedifferentieerde behoeften van verschillende toepassingsscenario's te voldoen.

Voor meer productinformatie of technische ondersteuning kunt u via de officiële website contact opnemen met Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd.