1,ADA 緩衝剤の基本概念
Q1: ADA 生物バッファとは何ですか?
ADAバッファ,名前はN (2-アセタミド) イミノディアセチン酸CAS 番号 26239554 効果性パッファリング範囲は pH 6.0~7.2 及び pKa 値は 25 時に約 6.6 で,ツヴィテリオニン有機化学パッファーの°C.
Q2: ADA バッファーの主要用途は?
ADAは生化学と分子生物学分野で広く使用されています.主な用途には以下が含まれます.
イン・ビトロ診断キット (ELISA,横断色素検知など) のバッファシステム
細胞培養基質のためのpH安定剤で,細胞成長を支援するためにタンパク質フリー基質に追加することができます.
タンパク質の酸化と不可逆のデナチュレーションを防ぐためのタンパク質電解とアイソエレクトリック焦点化
酵素反応システムのPH維持
カチオン交換色素学におけるバッファ剤
Q3: ADAバッファと他の Goodのバッファ (ACESなど) の違いは何ですか?
ADAとACESは Goodのバッファーであるが,以下の点で違いがある.
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比較項目 |
ADA |
ACES |
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効果性バッファ範囲 |
pH 6.0−72 |
pH 6.1 〜 7.5 |
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pKa(25°C) |
6.6 |
6.78 |
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紫外線吸収ピーク |
260nm |
230nm |
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主なケラート金属 |
Mn2+,CO2+,ニン2+,Zn2+,ク2+ |
Mg2+,ク2+ |
ADAは水にほとんど溶けないが,ナトリウム塩に溶解性が高い.実験の特定のpH範囲などの要因に基づいて,バッファエージェントの選択は包括的に検討されるべきである.メタルイオン互換性,検出方法
2,準備 と 使用 に つい て
Q4: ADA バッファー溶液をどのように準備しますか?
0.5M ADA バッファー溶液 (pH 6.61L) を例として:
1容器に約800mlのデイオニ化水を加える
295.08gのADAフリーアシドを加える
3混ぜる条件で10N NaOH溶液を滴ずつ加え,pH値を継続的に監視する.
4ADA が完全に溶け,pH が目標値に達するまで (例えば6.6) NaOH をゆっくりと加え続けます.
ADA粉末は純粋な水に完全に溶かさないので,pHを調整して完全に溶かさなければなりません.消毒用の22 μmフィルター膜.
Q5: ADA バッファー溶液の典型的作業濃度は?
ほとんどの哺乳類の細胞系では,10〜25mMの作業濃度から開始することを推奨します.特に:
一般的な哺乳類の細胞線 (HEK293,HeLaなど): 15-25mM
主要細胞と敏感細胞線: 5~15mM
特定の濃度は実験システムに従って最適化されるべきである.
Q6: ADA バッファーは準備後どのように保管しますか?有効期限はどのくらいですか?
ADA固体粉末は,密閉状態で,室温で,光から離れて,乾燥して保管する必要があります.°C準備されたADAバッファ溶液の提案:
4 保存する°C保存期間は約1年
梱包して保管する 20°C保存期間を延長する可能性があります
凍結 解凍 サイクル を 繰り返す こと を 避ける
3,干渉と互換性について
Q7:ADAバッファは タンパク質量化実験を妨げるのでしょうか?
ADAは BCAとローリー方法を用いたタンパク質量化実験で色生成反応を妨げる可能性がありますADA の 分子 構造 に ある イミノディアセト酸 の グループ が 銅 離子 を 効果的に 結晶 化 する こと に なり ます銅離子に対するBCA反応剤と競合し,したがって色反応を抑制する.実験でタンパク質定量化のためにBCA方法が必要である場合,定量化する前にサンプルをバッファ溶液に置き換えるか,ADA干渉の影響を受けない定量化方法を使用することが推奨されます..
Q8:ADAは金属イオンをケラートしますか?何に注意を払うべきですか?
ADAは,マンガン (II),銅 (II),ニッケル (II),亜鉛 (II),コバルト (II),などなどの金属イオンを2の比率でケラートする能力があります.1したがって,実験系内の酵素やタンパク質が活性を維持するためにこれらの金属イオンに依存している場合,ADAバッファ剤を使用する際には注意が必要です.カルシウム (Ca2) を用いる実験+マグネシウム (Mg 2+ADAの潜在的な効果を予備実験で評価することが推奨されます.
Q9: ADA バッファーのpH値が漂移するか溶液が曇りになるのか?
可能ですが,急速な劣化の可能性は低い.一般的な理由には:
1溶液に特定の金属イオンの高濃度がある場合,ADAと溶けない複合体を形成し,曇りや降水を引き起こす可能性があります.濃縮された貯蔵溶液や硬水を使用する際により一般的です.
2. 緩やかな水解: ADA 分子内のアセチルアミノグループは,極端なpH (強い酸または強い塩基) および/または長期間の高温条件下で緩やかな水解を受けることがあります.イミノディアセチン酸とアセタミドに分解する緩衝特性を変えてpHが変化する
金属汚染を避けるため,バッファ溶液を準備するために常に高純度水を使用し,推奨条件下で保管することが推奨されます.
4,選定と調達について
Q10 実験に適した ADA バッファーをどのように選ぶか?
異なる実験では ADA の純度が異なります
生物化学性 (≥98%): 通常の生化学実験と電球分解に適しています.
先進的な純度/超純度 (≥99%): 汚れに敏感な細胞培養,酵素動力学研究,診断用試薬開発に適しています
高純度製品は,実験結果の安定性と再現性を保証する,各バッチ間の差を効果的に減らすことができます.
Q11 湖北新興のADAバッファ製品の利点は?
Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd.は,この分野に深く関わっている生物学的バッファ剤ADAの生物学的バッファリング剤の研究開発,生産,品質管理システムを持っていますADAの純度が99%を超えますすべての技術指標は国際基準に厳格に準拠しています.Xindeshengは,完成品の検査に原材料の検査から完全なプロセス品質管理システムを確立しました異なるアプリケーションシナリオの異なるニーズを満たすためにカスタマイズされたサービスを提供することができます.
詳細の製品情報や技術サポートについては,公式ウェブサイトを通じて湖北新興材料技術株式会社に連絡してください.
