細胞培養の分野では,安定したpH環境を維持することは 健全な細胞成長を保証するための前提条件です.HEPESバッファツウィテリオンのバッファとして,体外受精,胚培養,温度変化に敏感でないため,ウイルス活性を維持する能力があるため,もちろん,使用中に光を避けるという重要な細部にも注意を払う必要があります.
温度変化に対する敏感度が低い
多くの生物学的バッファエージェントの離離定数は,温度変化に伴い著しく動きます.つまり,インキュベーターの温度のわずかな変動が システム全体の酸塩環境を変化させる可能性があります.この点において,HEPES はより安定性を示しています.その分解定数は温度によって大きく変化しません.低温下で酵素の構造と機能を維持するための理想的なバッファです異なる温度ノード間の転送を必要とする培養システム,例えば,インキュベーターから取り出された後,顕微鏡の下での長期観察HEPES は,小さな範囲内での pH 変動を制御し,細胞状態に対する温度変化の影響を軽減することができます..
ウイルス活動に対する保護効果
ウイルスの培養とタイトルの決定にはバッファ環境に対する要求が高くなります.ウイルス粒子の構造的整合性と宿主細胞を感染する能力は,pH変動に敏感です実践的な応用では,HEPESでバッファリングされたウイルス溶液は,ウイルスのバレンスの維持能力がより優れている.ウイルスは高い感染率を維持できますウイルス関連研究とワクチン生産の効率を向上させるのに有益です 37°Cの栽培条件下でHEPES を含まないウイルス溶液は,感染タイターに著しく大きな変化を示しましたHEPES が安定する役割を果たした.
イン・ビトロ受精と胚培養の役割
イン・ビトロ受精と初期胚の発達には 培養環境の非常に厳格な安定が必要です微小 な pH 変動 も,受精 率 や 胚 の 後 の 発達 能力 に 影響 するこのシナリオにおけるHEPESの価値は,特に Inkubatorの外で動作する場合,開かれた培養条件下で pH 安定性を維持する能力にあります.従来の二酸化炭素バッファシステムは,pHを制御するために二酸化炭素の濃度に依存します培養室を出ると,CO2濃度の変化が pH 値の急上昇を引き起こします.CO2バランスに依存せず,多重な蓋を開く作業がある顕微鏡や液体交換などのプロセスで使用するのに適しています..
軽い操作を避ける必要性
HEPES は 完全 に 惰性 な 物質 で は あり ませ ん.光 に 晒され たら,微量 の 水素過酸化 物質 が 生じ ます.水素過酸化は培養細胞や他の生物学的活性物体に毒性があるこの特性により,HEPESをバッファとして使用する場合は,操作は可能な限り,光を避ける条件で行われます.例えば,HEPESバッファ溶液を準備するときは,コンテナを包むために茶色のボトルまたはチンの薄膜を使用し,栽培作業中に光源を暗くします.長期保存中に暗闇に置いてくださいこれらの簡単な照明回避対策は,水素過酸化物の生成を効果的に削減し,細胞の健康を確保することができます.
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