Tris de grado de análisis, agente tampón comúnmente utilizado en laboratorios: características y escenarios de aplicación

En los experimentos de bioquímica y biología molecular, las soluciones tampón son fundamentales para mantener la estabilidad de los sistemas de reacción.Base de Tris(tris ((hydroxymethyl) aminomethane) es un amortiguador biológico de uso común.

Analizar las características básicas de la Tris pura

El Tris puro es un polvo cristalino blanco que es fácilmente soluble en agua.0Este nivel de producto tiene una alta pureza y un estricto control de las impurezas.que pueda satisfacer los requisitos de análisis de laboratorio de rutina y experimentos bioquímicos.

Base de Tris

Varias características notables:

1Estabilidad química: el Tris puro puede almacenarse durante mucho tiempo en condiciones secas, selladas y a temperatura ambiente.La solución preparada puede soportar esterilización a altas temperaturas y alta presión y no se descompone fácilmente..

2Disolución conveniente: puede disolverse rápidamente por agitación a temperatura ambiente, lo que facilita la preparación de soluciones de reserva de diferentes concentraciones.

3Baja interferencia de los iones metálicos: en comparación con los agentes amortiguadores de fosfato, Tris tiene una capacidad de quelante más débil para maglos iones de nasio y calcio, por lo que es adecuado para sistemas de reacción enzimática que contienen estos iones.

4. Sensibilidad a la temperatura: el valor del pH de la solución de Tris cambiará con la temperatura. Por ejemplo, una solución tampón con un pH de 8,0 preparada a 25 °C aumentará el pH en aproximadamente 0.4 a 4 °C y disminuir en aproximadamente 0.3 a 37 °C. Se recomienda ajustar el valor del pH en función de la temperatura de trabajo real antes de su uso.

Ámbito de aplicación típico del análisis Tris puro

La Tris analítica pura se puede utilizar en varios experimentos biológicos y químicos convencionales, y los siguientes son varios escenarios comunes.

1. Preparar una solución tampón de TAE o TBE para la electroforesis de gel de agarosa para detectar muestras de ADN o ARN. Para el análisis de banda de ácidos nucleicos de rutina, el nivel de pureza analítica es completamente competente.Si se trata de una manipulación de ARN de alta sensibilidad (como la construcción de bibliotecas de microARN), se recomienda el uso de Tris de grado no nucleasa.

2En el sistema SDS-PAGE, Tris se utiliza para preparar el tampón de gel de separación, el tampón de gel concentrado y el tampón de electroforesis.El amortiguador de transferencia en Western Blot a menudo se basa en TrisLa pureza del análisis Tris puro es suficiente para asegurar la estabilidad de estos experimentos con proteínas convencionales.

3Al purificar proteínas etiquetadas con histidina utilizando columnas de níquel, el tampón de ácido clorhídrico Tris se utiliza comúnmente para columnas de cromatografía de equilibrio y elución de proteínas diana.El grado analítico no introduce impurezas adicionales y no afecta al efecto de purificación.

4. Añadir Tris como amortiguador auxiliar al medio de cultivo celular (como DMEM) para ayudar a mantener la estabilidad del pH durante el proceso de cultivo.Tris puro puede utilizarse directamente para la preparación de soluciones relacionadas con cultivos celulares..

5Para cualquier titulación, análisis colorimétrico o calibración del pH que requiera un ambiente de amortiguador débilmente alcalino, el Tris analítico puro puede usarse como una opción confiable.

Precauciones para el uso

El análisis de Tris puro no es adecuado para experimentos que son muy sensibles a las nucleasas o los iones metálicos.puede interferir con ciertos métodos de cuantificación de proteínas (como el método de Bradford), en cuyo caso se puede utilizar el método BCA o el sistema de amortiguación.

Conclusión

El grado analítico Tris es un amortiguador de laboratorio con un rendimiento estable y una amplia aplicabilidad.garantizar tanto los resultados experimentales como los costes de contratación.

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