Tampon Bis Tris : caractéristiques, applications et points clés d'utilisation

Bis Trisest un tampon largement utilisé dans la recherche biochimique. En tant qu'amine tertiaire organique, elle transporte des protons instables avec une valeur pKa de 6,46 à 25 degrés Celsius et une plage tampon efficace couvrant un pH de 5,8 à 7,2. Il appartient au biotampon zwitterionique et doit son nom à sa structure moléculaire, qui comprend à la fois les familles structurelles bis (2-hydroxyéthyl) amine et Tris.

Propriétés physiques et chimiques et solubilité

Bis Tris a un poids moléculaire de 209,2 et une formule moléculaire de C ₈ H ₁ NO ₅. Il est hautement soluble dans l’eau et ne nécessite pas de méthodes de solubilisation particulières lors de la préparation de solutions tampons. Sa valeur pKa est proche du neutre, ce qui le rend adapté à une utilisation dans des conditions légèrement acides à presque neutres. Contrairement à certains agents tampons à forte absorption UV, le Bis Tris présente une interférence de fond plus faible aux longueurs d'onde de détection UV couramment utilisées et convient à la détection à l'aide de méthodes photométriques.

Scénarios d'application recommandés

Bis Tris a de multiples applications dans la recherche sur les protéines et les acides nucléiques. Il peut servir de tampon pour la chromatographie échangeuse d'anions, aidant à maintenir la stabilité du pH pendant le processus de séparation ; Dans les expériences d'électrophorèse, il peut être utilisé non seulement comme tampon d'électrophorèse, mais également comme composant de tampon de gel et de tampon d'échantillon. Lorsqu'il est utilisé avec ACES, il peut être utilisé comme tampon de fonctionnement pour l'électrophorèse sur gel. De plus, Bis Tris convient également aux expériences d’électrophorèse sur gel d’agarose. Le Bis Tris a également des applications dans les expériences de spectroscopie de résonance magnétique nucléaire et de cristallographie aux rayons X.

Capacité de chélation des métaux

En raison de l'introduction de deux groupes hydroxyéthyle, la molécule Bis Tris fournit davantage d'atomes donneurs d'électrons en paire isolée, présentant ainsi une capacité de chélation envers certains ions métalliques, similaire à l'EDTA ou à la Bicine. Il forme des complexes puissants avec les ions plomb et les ions cuivre et présente de faibles interactions avec les ions métalliques courants tels que le magnésium, le calcium, le manganèse, le cobalt, le nickel, le zinc et le cadmium. Cette caractéristique sélective présente à la fois des avantages et des inconvénients dans les applications pratiques : dans les systèmes impliquant des ions plomb ou cuivre, il convient de prêter attention à la complexation, mais dans la plupart des expériences conventionnelles, les faibles interactions avec les ions métalliques communs n'interfèrent pas de manière significative avec l'expérience.

Précautions d'utilisation

Le Bis Tris interagit avec les protéines de liaison aux acides gras du foie humain, ce qui peut affecter le comportement dynamique des protéines. Il convient de prêter attention aux recherches liées au FABP. De plus, le Bis Tris ne convient pas au dosage des protéines BCA car sa structure moléculaire peut interférer avec les réactions colorimétriques, entraînant des résultats de quantification des protéines biaisés. Dans la conception expérimentale, si la méthode BCA est nécessaire pour quantifier les protéines à l’avenir, d’autres systèmes tampons doivent être sélectionnés ou la méthode de quantification doit être modifiée.

jugement global

Bis Tris est un agent tampon complet dont les applications couvrent plusieurs domaines techniques tels que l'électrophorèse, la chromatographie et la spectroscopie. En remplacement du diméthylarsinate de sodium, de l'acide maléique et du citrate, il présente des avantages en termes de sécurité et de contrôle des interférences. La capacité chélatrice des métaux doit être évaluée sur la base de systèmes expérimentaux spécifiques, et l'interaction avec les protéines nécessite également que les utilisateurs y prêtent attention dans des études spécifiques. Comprendre correctement ces caractéristiques peut aider à utiliser le tampon Bis Tris de manière plus raisonnable dans les expériences biochimiques.

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