Häufige Probleme und Lösungen bei der Zubereitung der Tris-Pufferlösung

Produktname

Tris (hydroxymethyl) aminomethan

Chemische CAS TRIS-Puffer

Produkt

Die zubereitete Lösung erscheint trüb oder ausgefälltWeißes kristallines PulverCAS Nummer

77-86-1

Molekulare FormelC4H11NO3

Molekulares

Viele Labore sind daran gewöhnt, Tris-Stammlösungen mit einer Konzentration von 10-fach oder höher zuzubereiten und diese bei Bedarf auf die Arbeitskonzentration zu verdünnen. Bei der Zubereitung hochkonzentrierter Lösungen nimmt die Löslichkeit von Tris mit zunehmender Konzentration ab, insbesondere wenn die Sättigungsgrenze erreicht ist, und eine Temperaturabnahme kann zu Kristallisation führen. Daher wird empfohlen, hochkonzentrierte Stammlösungen bei Raumtemperatur oder leicht über Raumtemperatur zuzubereiten und eine vollständige Auflösung vor der Verpackung und Lagerung sicherzustellen. Überprüfen Sie vor Gebrauch auf Kristallisation nach der Verdünnung. Wenn Kristalle vorhanden sind, können diese vor Gebrauch durch geeignetes Erwärmen gelöst werden.Viele Experimentatoren haben die Erfahrung gemacht, den pH-Wert einer Tris-Lösung bei Raumtemperatur präzise auf den Zielwert einzustellen und ihn dann in einer 4°C-Kühlkammer oder einem 37°C-Inkubator erneut zu messen, wobei signifikante numerische Abweichungen auftreten. Dies ist kein Bedienungsfehler, sondern eine Eigenschaft von Tris selbst. Der pKa-Wert von Tris variiert mit der Temperatur, wobei der pH-Wert mit steigender Temperatur abnimmt und mit sinkender Temperatur zunimmt, mit einer Schwankungsbreite von etwa 0,025 bis 0,03 pH-Einheiten pro Grad Celsius. Die Lösung ist nicht kompliziert, und die tatsächliche Gebrauchstemperatur sollte bei der Zubereitung im Voraus berücksichtigt werden. Wenn die Pufferlösung bei 37°C verwendet werden soll, erwärmen Sie sie in einem 37°C-Wasserbad, bevor Sie den pH-Wert einstellen. Wenn sie bei 4°C verwendet werden soll, stellen Sie die Lösung zur Kühlung in eine Kühlkammer und lassen Sie die Temperatur stabilisieren, bevor Sie sie kalibrieren. Für Experimente bei Raumtemperatur kann die Kalibrierung bei Raumtemperatur ohne zusätzliche Verarbeitung erfolgen.Standardverpackung500g/Flasche

Hersteller

Viele Labore sind daran gewöhnt, Tris-Stammlösungen mit einer Konzentration von 10-fach oder höher zuzubereiten und diese bei Bedarf auf die Arbeitskonzentration zu verdünnen. Bei der Zubereitung hochkonzentrierter Lösungen nimmt die Löslichkeit von Tris mit zunehmender Konzentration ab, insbesondere wenn die Sättigungsgrenze erreicht ist, und eine Temperaturabnahme kann zu Kristallisation führen. Daher wird empfohlen, hochkonzentrierte Stammlösungen bei Raumtemperatur oder leicht über Raumtemperatur zuzubereiten und eine vollständige Auflösung vor der Verpackung und Lagerung sicherzustellen. Überprüfen Sie vor Gebrauch auf Kristallisation nach der Verdünnung. Wenn Kristalle vorhanden sind, können diese vor Gebrauch durch geeignetes Erwärmen gelöst werden.Viele Experimentatoren haben die Erfahrung gemacht, den pH-Wert einer Tris-Lösung bei Raumtemperatur präzise auf den Zielwert einzustellen und ihn dann in einer 4°C-Kühlkammer oder einem 37°C-Inkubator erneut zu messen, wobei signifikante numerische Abweichungen auftreten. Dies ist kein Bedienungsfehler, sondern eine Eigenschaft von Tris selbst. Der pKa-Wert von Tris variiert mit der Temperatur, wobei der pH-Wert mit steigender Temperatur abnimmt und mit sinkender Temperatur zunimmt, mit einer Schwankungsbreite von etwa 0,025 bis 0,03 pH-Einheiten pro Grad Celsius. Die Lösung ist nicht kompliziert, und die tatsächliche Gebrauchstemperatur sollte bei der Zubereitung im Voraus berücksichtigt werden. Wenn die Pufferlösung bei 37°C verwendet werden soll, erwärmen Sie sie in einem 37°C-Wasserbad, bevor Sie den pH-Wert einstellen. Wenn sie bei 4°C verwendet werden soll, stellen Sie die Lösung zur Kühlung in eine Kühlkammer und lassen Sie die Temperatur stabilisieren, bevor Sie sie kalibrieren. Für Experimente bei Raumtemperatur kann die Kalibrierung bei Raumtemperatur ohne zusätzliche Verarbeitung erfolgen.(Tris-Rohmaterial 25kg/Trommel)Tris-Pulver ist anfällig für Feuchtigkeitsaufnahme beim Wiegen

Tris-Pulver hat einen gewissen Grad an Feuchtigkeitsaufnahme, insbesondere in Jahreszeiten mit hoher Luftfeuchtigkeit. Beim Wiegen nach dem Öffnen der Reagenzflasche nimmt das Pulver leicht Feuchtigkeit aus der Luft auf, was zu einem höheren Wiegeergebnis und einer höheren Konzentration der zubereiteten Lösung als erwartet führt. Obwohl diese Abweichung die meisten Pufferlösungen nur geringfügig beeinflusst, ist sie bei Experimenten, die eine präzise Konzentration erfordern, dennoch zu beachten. Es wird empfohlen, die Reagenzflasche vor dem Wiegen aus dem Lagerort zu entfernen und sie eine Zeit lang stehen zu lassen, bis sich die Temperatur mit der Raumtemperatur ausgeglichen hat, um Kondensation von Wasserdampf auf der Oberfläche der kalten Reagenzflasche zu vermeiden. Versuchen Sie beim Wiegen, so schnell wie möglich vorzugehen und den Flaschenhals nach Gebrauch sofort zu verschließen. Wenn die Luftfeuchtigkeit im Labor hoch ist, sollten Sie die Lagerung von Tris-Pulver in einem Trockenschrank oder die Verwendung eines versiegelten Behälters mit einem Trockenmittel in Erwägung ziehen.

PH-Wert-Änderungen nach SterilisationNach der Hochdrucksterilisation kann der pH-Wert der zubereiteten Tris-Lösung manchmal signifikante Änderungen aufweisen, meist leicht niedriger als vor der Sterilisation. Dies liegt daran, dass die hohe Temperatur während der Hochdrucksterilisation zu Veränderungen im gelösten Sauerstoff- und Kohlendioxidgehalt der Tris-Lösung führt und die hohe Temperatur selbst auch das Säure-Basen-Gleichgewicht von Tris beeinflusst. Nach der Sterilisation sinkt die Temperatur der Lösung allmählich, aber es kann immer noch ein Unterschied von 0,1 bis 0,2 Einheiten im pH-Wert im Vergleich zu vor der Sterilisation bestehen. Eine praktikable Lösung für dieses Problem ist es, den pH-Wert bei der Zubereitung leicht über den Zielwert einzustellen, zu sterilisieren und abzukühlen, bevor er gemessen und angepasst wird. Ein sichererer Ansatz ist die Kalibrierung des pH-Wertes nach Sterilisation und Abkühlung. Wenn die kalibrierte Lösung versiegelt aufbewahrt wird, treten keine signifikanten Änderungen aufgrund der anschließenden Lagerung auf.Die zubereitete Lösung erscheint trüb oder ausgefälltManchmal, nach einer gewissen Lagerzeit, kann die zubereitete Tris-Lösung flockig weiß oder leicht trüb erscheinen. Diese Situation hängt in der Regel mit der Zubereitung von Wasser oder Behältern zusammen. Wenn das verwendete Wasser eine hohe Härte aufweist, können die Kalzium- und Magnesiumionen im Wasser unlösliche Salze mit bestimmten Bestandteilen der Tris-Lösung bilden. Darüber hinaus können unvollständige Reinigung des Behälters und Rückstände von Reinigungsmitteln oder anderen Chemikalien ebenfalls zu Ausfällungen führen. Der Schlüssel zur Vermeidung dieses Problems ist die Verwendung von frisch zubereitetem ultrareinem Wasser oder deionisiertem Wasser zur Zubereitung der Lösung, das gründliche Spülen des Behälters mit reinem Wasser vor Gebrauch und die Vermeidung der Verwendung von lang gelagertem reinem Wasser. Wenn bereits Trübungen aufgetreten sind, die Lösung selbst aber noch einen praktischen Wert hat, können Sie versuchen, eine 0,22-Mikron-Filtermembran zur Entfernung von Partikeln zu verwenden. Für kritische Experimente wird jedoch weiterhin eine Neukonfiguration empfohlen.

Vorsichtsmaßnahmen bei der Zubereitung von hochkonzentrierten Stammlösungen

Viele Labore sind daran gewöhnt, Tris-Stammlösungen mit einer Konzentration von 10-fach oder höher zuzubereiten und diese bei Bedarf auf die Arbeitskonzentration zu verdünnen. Bei der Zubereitung hochkonzentrierter Lösungen nimmt die Löslichkeit von Tris mit zunehmender Konzentration ab, insbesondere wenn die Sättigungsgrenze erreicht ist, und eine Temperaturabnahme kann zu Kristallisation führen. Daher wird empfohlen, hochkonzentrierte Stammlösungen bei Raumtemperatur oder leicht über Raumtemperatur zuzubereiten und eine vollständige Auflösung vor der Verpackung und Lagerung sicherzustellen. Überprüfen Sie vor Gebrauch auf Kristallisation nach der Verdünnung. Wenn Kristalle vorhanden sind, können diese vor Gebrauch durch geeignetes Erwärmen gelöst werden.(Tris weißes Rohmaterialpulver)