TRIS buffer: μια κλασική επιλογή με πλεονεκτήματα και περιορισμούς

Το buffer TRIS είναι ένα από τα πιο ευρέως χρησιμοποιούμενα buffer συστήματα σε βιοχημικά εργαστήρια.Έχει γίνει η πρώτη επιλογή για πολλά πειραματικά προγράμματα λόγω του ευρέος εύρους προσαρμογής του pH και της καλής βιοσυμβατότηταςΩστόσο, κανένα σύστημα αποθήκευσης δεν είναι παντοδύναμο, καιΚωδός ασφαλείας TRISέχει επίσης περιορισμούς όπως επιδράσεις συγκέντρωσης, ευαισθησία θερμοκρασίας, απορρόφηση CO2 και παρεμβολές ηλεκτροδίων.Η πλήρης κατανόηση αυτών των χαρακτηριστικών μπορεί να βοηθήσει στη χρήση τους στα κατάλληλα σενάρια και την έγκαιρη αντικατάστασή τους με ένα πιο κατάλληλο σύστημα αποθήκευσης όταν δεν εφαρμόζεται..

Ευρεία δυνατότητα ρύθμισης του pH

Η υψηλή αλκαλικότητα του αποθέτη TRIS του επιτρέπει να προετοιμάζει ανεξάρτητα διαλύματα αποθέτη που κυμαίνονται από όξινα έως αλκαλικά.Απλά ρυθμίστε με υδροχλωρικό οξύ για να πάρετε TRIS HCl συστήματα αποθήκευσης με διαφορετικές τιμές pHΗ απλότητα αυτή μειώνει σημαντικά την πολυπλοκότητα της παρασκευής και μειώνει επίσης τον κίνδυνο εισαγωγής πρόσθετων προσμείξεων.

Καλή βιοσυμβατότητα

Το TRIS έχει ελάχιστη παρέμβαση στις βιοχημικές διεργασίες.και ιόντα βαρέων μετάλλωνΑυτό το χαρακτηριστικό είναι ιδιαίτερα σημαντικό σε ενζυμικές αντιδράσεις που περιλαμβάνουν ιόντα μετάλλων, καθαρισμό πρωτεϊνών και εργασίες νουκλεϊκών οξέων.Η χρήση του συστήματος αποθήκευσης TRIS μπορεί να αποτρέψει την απώλεια δραστηριότητας ή την απόκλιση των πειραματικών αποτελεσμάτων που προκαλείται από την εξάντληση των ιόντων μετάλλου.

Επίδραση συγκέντρωσης και προφυλάξεις χρήσης

Η τιμή pH του αποθέτη TRIS επηρεάζεται σημαντικά από τη συγκέντρωση του διαλύματος.Αυτό το μέγεθος δεν μπορεί να αγνοηθεί για ορισμένα πειράματα ακριβείαςΩς εκ τούτου, κατά τη χρήση του buffer TRIS, το μητρικό υγρό δεν πρέπει να αραιώνεται αυθαίρετα και να χρησιμοποιείται απευθείας.πρέπει να παρασκευάζεται και να βαθμολογείται στην στόχο συγκέντρωση με βάση την τελική απαιτούμενη συγκέντρωση και τιμή pH.

Ευαισθησία στη θερμοκρασία και βασικά σημεία προετοιμασίας

Το pKa του TRIS ποικίλλει σημαντικά με την θερμοκρασία, με συντελεστή θερμοκρασίας αρνητικού 0,031 ανά βαθμό Κελσίου.4 σε 4 °C θα μειωθεί σε περίπου 7.4 σε θερμοκρασία 37 °C. Μια τέτοια σημαντική μετατόπιση είναι αρκετή για να μεταβάλλει το πραγματικό περιβάλλον ορισμένων ενζυμικών συστημάτων αντίδρασης.Η σωστή προσέγγιση είναι να προετοιμαστεί και να βαθμονομηθεί το διάλυμα απόσβεσης στην πραγματική θερμοκρασία που χρησιμοποιείται στο πείραμα.Το μασάζ TRIS HCl που παρασκευάζεται σε θερμοκρασία δωματίου δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί άμεσα για πειράματα χαμηλής θερμοκρασίας από 0 °C έως 4 °C και αντίστροφα.το πραγματικό pH θα αποκλίνει σημαντικά από τις προσδοκίες.

Απαιτήσεις απορρόφησης και αποθήκευσης CO2

Το TRIS buffer είναι επιρρεπές στην απορρόφηση διοξειδίου του άνθρακα από τον αέρα.που μεταβάλλει την ισορροπία οξέων-βασών του συστήματος απόσβεσης και οδηγεί σε σταδιακή μείωση του pHΓια τα δοχεία που απαιτούν μακροχρόνια χρήση ή επαναλαμβανόμενο άνοιγμα, το TRIS buffer πρέπει να είναι στενά σφραγισμένο και αποθηκευμένο μετά την παρασκευή.συνιστάται να συσκευάζονται σε μικρότερα μεγέθη για να μειώνεται ο αριθμός και η διάρκεια της έκθεσης στον αέραΚατά τη χρήση, είναι επίσης απαραίτητο να αποφεύγεται η παρατεταμένη ανοιχτή ανάμειξη ή θέρμανση.

Συνδυασμός ηλεκτροδίων

Το buffer TRIS μπορεί να παρεμβαίνει σε ορισμένα ηλεκτρόδια pH, προκαλώντας μετατόπιση ανάγνωσης ή πιο αργή απόκριση.Αυτό οφείλεται στο γεγονός ότι τα μόρια TRIS μπορεί να επηρεάσουν το δυναμικό σύνδεσης υγρού του ηλεκτρόδου ή να αλληλεπιδρούν με το ηλεκτρολύτη αναφοράς μέσα στο ηλεκτρόδιοΩς εκ τούτου, κατά τη μέτρηση της τιμής pH του διαλύματος tampon TRIS, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιείται ένα ειδικό ηλεκτρόδιο συμβατό με το διάλυμα TRIS,ή να καθαρίσει και να βαθμολογήσει το συμβατικό ηλεκτρόδιο εγκαίρως μετά τη χρήση, ώστε να αποφευχθούν υπολειμματικές επιπτώσεις σε μεταγενέστερες μετρήσεις.

Η ολοκληρωμένη κατανόηση των χαρακτηριστικών των πρακτικών αποθήκευσης TRIS μπορεί να βοηθήσει τους αγοραστές να τα χρησιμοποιήσουν καλύτερα.βιολογικά αποθηκευτικά παράγοντεςΕάν έχετε οποιεσδήποτε ανάγκες αγοράς στο εγγύς μέλλον, παρακαλώ κάντε κλικ στην επίσημη ιστοσελίδα για περισσότερες λεπτομέρειες ή επικοινωνήστε μαζί μου απευθείας!