TRISバッファは生化学実験室で最も広く使用されているバッファシステムの一つです.pH 調節範囲が広く,生体互換性が良好であるため,多くの実験計画で最初の選択になりました.しかし,バッファリングシステムは全能ではありません.TRISバッファ濃度効果,温度感度,CO2吸収,電極干渉などの制限もあります.これらの特徴の包括的な理解は,適切なシナリオでそれを使用し,それが適用できない場合,より適切なバッファーシステムに適時に置き換えることができます..
広範囲にpHを調整する能力
TRISバッファの高アルカリ性により,酸性からアルカリ性までのバッファ溶液を独立して調製できます.複数のバッファ成分を混合する必要はありません.塩化水素で調整すると,異なるpH値を持つTRIS HClバッファシステムが得られますこの単純さは,準備の複雑さを大幅に軽減し,また,追加の不純物の導入のリスクを軽減します.
良質な生物互換性
TRIS は生化学的プロセスに最小限の干渉をします.多くの生物学的反応は金属イオンに敏感で,TRIS はカルシウムイオン,マグネシウムイオン,重金属イオンこの特徴は,金属イオン,タンパク質浄化,核酸操作を含む酵素反応において特に重要です.TRIS バッファーの利用は,金属イオン枯渇による活動喪失や実験結果の偏差を回避できる..
濃度効果と使用注意事項
TRISバッファのpH値は溶液濃度によって大きく影響される.バッファを10倍稀释すると,pH値は0.1単位以上変化する.この大きさは,特定の精密度実験のために無視することはできませんしたがって,TRISバッファを使用するとき,母液は任意に稀釋されず,直接使用されるべきではありません.最終的に必要な濃度とpH値に基づいて,目標濃度で再調製し,校正する必要があります..
温度感受性と調理の重要なポイント
TRISのpKaは温度によって大きく変化し,温度係数は摂氏度あたりマイナス0.031である.これは,pHが8のバッファ溶液であることを意味します.4 °Cで約7 °Cに下がります.4 37°Cで.このような重要な漂流は,特定の酵素反応システムの実際の環境を変えるのに十分である.正確なアプローチは,実験で使用される実際の温度でバッファ溶液を準備し,校正することです.室温で調製されたTRIS HClバッファは,0 °Cから4 °Cまでの低温実験に直接使用できません.実際のpHは期待値と大きく異なる.
CO2吸収と貯蔵に関する要件
TRISバッファは空気から二酸化炭素を吸収する傾向があります CO2は水に溶け,炭素酸を形成します緩衝システムの酸塩バランスを変化させ,PHを徐々に低下させる. この特性により,TRISバッファは,準備後に密閉して保管する必要があります.長期使用または繰り返し開封を必要とする容器では,空気に曝露する数と期間を減らすために,それらを小さいサイズに詰め込むことが推奨されます.使用中に,長時間開き混ぜたり加熱したりすることは避けなければなりません.
電極互換性
TRISバッファは,特定のpH電極を干渉し,読み取りの漂移または応答の遅さを引き起こします.これは,TRIS分子が電極の液体結合電位に影響を与えるか,電極内の基準電解液と相互作用する可能性があるからです.したがって,TRISバッファ溶液のpH値を測定する際には,TRIS溶液と互換性のある専用電極を使用する必要があります.または,従来の電極を使用後,その後の測定に残留効果を避けるために,適時に清掃し,校正する..
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