TRIS buffer: uma escolha clássica com vantagens e limitações

O tampão TRIS é um dos sistemas de tampão mais utilizados em laboratórios bioquímicos.Tornou-se a primeira escolha para muitos esquemas experimentais devido à sua ampla gama de ajuste de pH e boa biocompatibilidadeNo entanto, nenhum sistema de amortecimento é onipotente, eReservatório TRIStambém tem limitações como efeitos de concentração, sensibilidade à temperatura, absorção de CO2 e interferência do eletrodo.Uma compreensão abrangente destas características pode ajudar a utilizá-lo nos cenários corretos e substituí-lo por um sistema de amortecimento mais adequado em tempo útil quando não for aplicável.

Capacidade de ajuste amplo do pH

A alta alcalinidade do tampão TRIS permite-lhe preparar de forma independente soluções de tampão que variam de ácidas a alcalinas.basta ajustar com ácido clorídrico para obter sistemas tampão TRIS HCl com diferentes valores de pHEsta simplicidade reduz consideravelmente a complexidade da preparação e também reduz o risco de introdução de impurezas adicionais.

Boa biocompatibilidade

O TRIS tem interferências mínimas nos processos bioquímicos. Muitas reações biológicas são sensíveis aos íons metálicos, enquanto o TRIS não sofre reações de precipitação com íons cálcio, íons magnésio,e íons de metais pesadosEsta característica é particularmente importante nas reações enzimáticas que envolvem íons metálicos, purificação de proteínas e operações de ácidos nucleicos.A utilização do sistema de amortecimento TRIS pode evitar a perda de atividade ou o desvio dos resultados experimentais causados pela depleção dos íons metálicos.

Efeito da concentração e precauções de utilização

O valor de pH do tampão TRIS é muito afetado pela concentração da solução.Esta magnitude não pode ser ignorada para certos experimentos de precisãoPor conseguinte, ao utilizar o tampão TRIS, o líquido-mãe não deve ser diluído arbitrariamente e utilizado directamente.deve ser preparado e calibrado na concentração-alvo com base na concentração final exigida e no valor de pH.

Sensibilidade à temperatura e pontos-chave de preparação

O pKa do TRIS varia significativamente com a temperatura, com um coeficiente de temperatura de -0,031 por grau Celsius.4 a 4 °C cairá para cerca de 7.4 a 37 °C. Esta deriva significativa é suficiente para alterar o ambiente real de certos sistemas de reacção enzimática.A abordagem correta é preparar e calibrar a solução tampão na temperatura real utilizada no experimentoO tampão TRIS HCl preparado à temperatura ambiente não pode ser utilizado directamente para experimentos a baixas temperaturas, de 0 °C a 4 °C, e vice-versa.o pH real irá desviar-se significativamente das expectativas.

Requisitos de absorção e armazenamento de CO2

O tampão TRIS é propenso a absorver dióxido de carbono do ar. O CO2 dissolve-se em água para formar ácido carbónico,que altera o equilíbrio ácido-base do sistema tampão e leva a uma diminuição gradual do pHEsta característica exige que o tampão TRIS seja bem selado e armazenado após a preparação.Recomenda-se embala-los em tamanhos menores para reduzir o número e a duração da exposição ao ar.Durante a utilização, é igualmente necessário evitar a mistura aberta ou o aquecimento prolongados.

Compatibilidade dos eletrodos

O tampão TRIS pode interferir com certos eletrodos de pH, causando deriva de leitura ou resposta mais lenta.Isso ocorre porque as moléculas TRIS podem afetar o potencial de junção líquido do eletrodo ou interagir com o eletrólito de referência dentro do eletrodoPor conseguinte, ao medir o valor de pH da solução tampão TRIS, é necessário utilizar um elétrodo dedicado compatível com a solução TRIS,ou para limpar e calibrar o elétrodo convencional em tempo útil após a utilização, a fim de evitar efeitos residuais nas medições subsequentes.

Uma compreensão abrangente das características dos agentes tampão TRIS pode ajudar os compradores a usá-los melhor.Agentes de amortecimento biológicosSe você tiver quaisquer necessidades de compra no futuro próximo, por favor clique no site oficial para mais detalhes ou entre em contato comigo diretamente!