Προφυλάξεις για τη χρήση του HEPES: Αποφύγετε τις φωτεινές παγίδες για να εξασφαλιστεί η αξιοπιστία των κυτταρικών πειραμάτων

Σε βιοχημικά και κυτταρικά πειράματα,Ταμείο ασφαλείας HEPES(4- υδροξυαιθυλπιπεραζίνη αιθανουσουλφονικό οξύ) χρησιμοποιείται ευρέως ως ζβιτεριονικό απο tampon λόγω της ισχυρής του ικανότητας απο tampon εντός της φυσιολογικής κλίμακας pH και της χαμηλής κυτταροτοξικότητας.εάν χρησιμοποιείται ή αποθηκεύεται ακατάλληλα, το HEPES μπορεί επίσης να εισάγει πειραματικούς παράγοντες παρεμβολής.Τα παρακάτω περιγράφουν τις βασικές προφυλάξεις κατά τη χρήση για να σας βοηθήσουν να αποκτήσετε πιο σταθερά αποτελέσματα πειραματικών δοκιμών..

1,Φόρμα σκόνης: Ανθεκτική σε υψηλές θερμοκρασίες αλλά όχι "απολύτως σταθερή"

Η σκόνη HEPES έχει υψηλή θερμική σταθερότητα, με σημείο τήξης περίπου 200 °C.Αυτό το χαρακτηριστικό σημαίνει ότι η συμβατική επεξεργασία αποστείρωσης με ατμό υψηλής πίεσης δεν θα προκαλέσει αποδόμηση ή αποτυχία της σκόνης HEPES.Ως εκ τούτου, πριν από την παρασκευή του διαλύματος tampon, εάν η σκόνη πρέπει να αποστειρωθεί,η αποστείρωση υψηλής πίεσης μπορεί να επιλεγεί χωρίς να ανησυχεί για υψηλή θερμοκρασία που βλάπτει τη δραστηριότητα αποθήκευσης.

HEPES σκόνη

Ωστόσο, πρέπει να σημειωθεί ότι το HEPES σε σκόνη δεν έχει απαιτήσεις αποθήκευσης.Συνιστάται η αποθήκευση της σκόνης HEPES σε στεγνό εσωτερικό περιβάλλον και η αποφυγή της παρατεταμένης άμεσης έκθεσης στο ηλιακό φως.Αν και οι σκόνες δεν υποβάλλονται σε φωτοχημικές αντιδράσεις τόσο γρήγορα όσο τα υδατικά διαλύματα,η μακροχρόνια έκθεση σε έντονο φως μπορεί να προκαλέσει αργές αλλαγές στις ιδιότητες της επιφάνειας ή αλληλεπιδράσεις με τα υλικά συσκευασίαςΗ επιλογή ενός σφραγισμένου, σκοτεινού και ξηρού δοχείου αποθήκευσης είναι ευεργετική για τη διατήρηση της μακροχρόνιας σταθερότητας της σκόνης.

2,Κίνδυνος φωτοευαισθησίας υδατικού διαλύματος: παραγωγή υπεροξειδίου του υδρογόνου

Σε αντίθεση με την μορφή σκόνης, μόλις το HEPES διαλυθεί σε νερό, η ευαισθησία του στο περιβάλλον αυξάνεται σημαντικά.Έρευνες έχουν διαπιστώσει ότι η έκθεση του υδατικού διαλύματος HEPES σε φυσιολογικό φως για περίπου τρεις ώρες παράγει κυτταροτοξικό υπεροξείδιο του υδρογόνου (H 2 O 2) στο διάλυμα.Το υπεροξείδιο του υδρογόνου, ως αντιδραστικό είδος οξυγόνου, μπορεί να βλάψει τις κυτταρικές μεμβράνες, τις πρωτεΐνες και τα νουκλεϊκά οξέα, να παρεμβαίνει στον φυσιολογικό κυτταρικό μεταβολισμό και ακόμη και να προκαλέσει την αποψίλωση των κυττάρων.

Αυτός ο κίνδυνος είναι ιδιαίτερα αξιοσημείωτος σε πειράματα που είναι ευαίσθητα στις καταστάσεις οξειδωτικής αναστολής, όπως η κυτταρική καλλιέργεια, η ανίχνευση φθορισμού και οι δοκιμές δραστηριότητας ενζύμων.Παρόλο που το ίδιο το HEPES είναι φιλικό προς τα κύτταραΓια τον λόγο αυτό, το παρασκευασμένο υδατικό διάλυμα HEPES πρέπει να προστατεύεται αυστηρά από το φως.συμπεριλαμβανομένης της χρήσης καφέ γυάλινων φιάλωνΚατά τη διάρκεια της πειραματικής λειτουργίας, το διάλυμα αποθηκεύεται σε ένα ειδικό ντουλάπι που ελέγχεται με φως.ο χρόνος έκθεσης του διαλύματος στο φως του τραπεζιού πρέπει επίσης να ελαχιστοποιείται όσο το δυνατόν περισσότερο..

3,Θερμοκρασία αποθήκευσης και διάρκεια ζωής: συνιστάται ψύξη 4 °C

Για το ήδη παρασκευασμένο απο tampon HEPES συνιστάται να φυλάσσεται σε ψυγείο σε θερμοκρασία 4 °C. Το περιβάλλον χαμηλής θερμοκρασίας μπορεί να επιβραδύνει τον ρυθμό πιθανών ανεπιθύμητων αντιδράσεων στο διάλυμα,συμπεριλαμβανομένων των υπολειπόμενων φωτοχημικών αντιδράσεων και της μικροβιακής ανάπτυξηςΕν τω μεταξύ, ακόμη και σε σκοτεινές συνθήκες, η μακροχρόνια αποθήκευση μπορεί να οδηγήσει σε μια αργή μείωση τηςΣυνιστάται να χρησιμοποιείται μέσα σε σύντομο χρονικό διάστημα μετά την παρασκευή για να εξασφαλιστεί η σταθερότητα και η συμβατότητα των κυττάρων του συστήματος αποθήκευσης.

Εάν απαιτείται μεγαλύτερος χρόνος αποθήκευσης, πρέπει να εξεταστεί η συσκευασία και η κατάψυξη σε θερμοκρασία -20 °C. Ωστόσο, θα πρέπει να σημειωθεί ότι οι επαναλαμβανόμενοι κύκλοι κατάψυξης-ανάψυξης μπορεί να προκαλέσουν μικρές μεταβολές της συγκέντρωσης ή του pH του HEPES,έτσι ο όγκος της συσκευασίας θα πρέπει να βασίζεται σε ποσότητα μίας χρήσηςΠριν από την κατάψυξη της αποθήκευσης, πρέπει να επιβεβαιωθεί ότι το δοχείο είναι πλήρως προστατευμένο από το φως και να χρησιμοποιείται ένα σφραγισμένο σωλήνα ανθεκτικό σε χαμηλές θερμοκρασίες.

4,Εργασιακές προτάσεις σε πρακτικές εφαρμογές

Βάσει των παραπάνω χαρακτηριστικών, τα ακόλουθα απλά μέτρα μπορούν να ληφθούν σε καθημερινά πειράματα:επαρκεί ο κανονικός εσωτερικός φωτισμός χωρίς να απαιτείται ειδική σκιά· Δεύτερον, αμέσως μετά την προετοιμασία του διαλύματος, προσαρμόστε το pH στην τιμή στόχου (συνήθως 7,2-7,4) και στη συνέχεια μεταφέρετε το σε ένα σκοτεινό δοχείο.εάν απαιτείται παρατεταμένη παρατήρηση των κυττάρων ή απεικόνιση ζωντανών κυττάρων στο πείραμα, συνιστάται να χρησιμοποιείται φρέσκος προετοιμασμένος θόρυβος HEPES και να ελαχιστοποιείται ο χρόνος έκθεσης του διαλύματος κάτω από την πηγή φωτός του μικροσκοπίου.μπορεί να εξεταστεί η προσθήκη καταλάσης ή μειωτικών παραγόντων στο απόθεμα ασφαλείας HEPES, αλλά αυτό πρέπει να αξιολογηθεί προσεκτικά με βάση το πειραματικό σύστημα.

5,Σύνοψη

Το HEPES είναι ένα αξιόπιστο buffering agent, αλλά η φωτοευαισθησία του σε υδατικό διάλυμα δεν μπορεί να αγνοηθεί.,Οι στρατηγικές ψύξης και βραχυπρόθεσμης ψύξης μπορούν να μειώσουν αποτελεσματικά τον κίνδυνο παραγωγής υπεροξειδίου του υδρογόνου και να βελτιώσουν την επαναληψιμότητα και την αξιοπιστία των πειραματικών δεδομένων.Η ανάπτυξη της συνήθειας της "έτοιμης χρήσης και προστατευμένης από το φως αποθήκευσης" στις καθημερινές λειτουργίες είναι ένα σημαντικό μέρος της αξιοποίησης των πλεονεκτημάτων του HEPES.

Συσκευασία προϊόντος

Ως κατασκευαστής θραύσματος HEPES,ΝτεσένγκΕπομένως, μόνον όταν η συσκευασία και η ποιότητα πληρούν τα πρότυπα μπορούν να πωληθούν από το εργοστάσιο.,Αν έχετε σχετικές προθέσεις, κάντε κλικ στην ιστοσελίδα για να ρωτήσετε για λεπτομέρειες και αγορά!