Die Photosensitivität von HEPES 7365-45-9 und ihre Auswirkungen auf biologische Experimente

Produkt Name

4-Hydroxyethylpiperazinethansulfonsäure

Chemische Abkürzung

HEPES-Puffer

CAS Nummer

7365-45-9

Auswirkungen auf biologische Systemerodukt Aussehen

Weißes kristallines Pulver

Experimentatoren können die durch die HEPES-Photosensitivität verursachten Störungen durch mehrere Methoden reduzieren. Erstens, nach der Zubereitung der HEPES-haltigen Lösung, diese in Aluminiumfolie oder braunen Reagenzgläsern dunkel lagern und tägliche Lichteinwirkung vermeiden. Zweitens, während der Zellkultur und der Durchführung von Operationen, versuchen, unnötige Lichtquellen auszuschalten oder gelbe Leuchtstoffröhren mit Wellenlängenfilterung von blauem/UV-Licht zu verwenden. Drittens, für Langzeitbeobachtungen (wie die Lebendzellbildgebung), kann die Verwendung eines Puffersystems mit geringerer Photosensitivität wie PIPES (Piperazin-1,4-diethansulfonsäure) oder Phosphatpufferlösung in Betracht gezogen werden. PIPES hat eine deutlich schwächere Fähigkeit, unter Lichteinfluss reaktive Sauerstoffspezies zu erzeugen als HEPES. Viertens, wenn HEPES im Experiment nicht ersetzt werden kann, können Antioxidantien (wie Liponsäure, Trolox oder Natriumpyruvat) dem Puffer zugesetzt werden, um das durch Lichteinwirkung erzeugte Wasserstoffperoxid zu entfernen. Es sollte jedoch beachtet werden, ob die Antioxidantien selbst das Experiment stören. Fünftens, bei der Bewertung der Auswirkungen von HEPES kann eine Kontrolle eingerichtet werden: dieselbe Pufferlösung kann unter denselben Lichtbedingungen platziert und dann die Konzentration von Wasserstoffperoxid oder die Auswirkungen auf die Aktivität von Standardproben (wie spezifische Enzyme) gemessen werden, um festzustellen, ob die Photosensitivität ein inakzeptables Niveau erreicht hat.ormel238,305M

olekulare

Experimentatoren können die durch die HEPES-Photosensitivität verursachten Störungen durch mehrere Methoden reduzieren. Erstens, nach der Zubereitung der HEPES-haltigen Lösung, diese in Aluminiumfolie oder braunen Reagenzgläsern dunkel lagern und tägliche Lichteinwirkung vermeiden. Zweitens, während der Zellkultur und der Durchführung von Operationen, versuchen, unnötige Lichtquellen auszuschalten oder gelbe Leuchtstoffröhren mit Wellenlängenfilterung von blauem/UV-Licht zu verwenden. Drittens, für Langzeitbeobachtungen (wie die Lebendzellbildgebung), kann die Verwendung eines Puffersystems mit geringerer Photosensitivität wie PIPES (Piperazin-1,4-diethansulfonsäure) oder Phosphatpufferlösung in Betracht gezogen werden. PIPES hat eine deutlich schwächere Fähigkeit, unter Lichteinfluss reaktive Sauerstoffspezies zu erzeugen als HEPES. Viertens, wenn HEPES im Experiment nicht ersetzt werden kann, können Antioxidantien (wie Liponsäure, Trolox oder Natriumpyruvat) dem Puffer zugesetzt werden, um das durch Lichteinwirkung erzeugte Wasserstoffperoxid zu entfernen. Es sollte jedoch beachtet werden, ob die Antioxidantien selbst das Experiment stören. Fünftens, bei der Bewertung der Auswirkungen von HEPES kann eine Kontrolle eingerichtet werden: dieselbe Pufferlösung kann unter denselben Lichtbedingungen platziert und dann die Konzentration von Wasserstoffperoxid oder die Auswirkungen auf die Aktivität von Standardproben (wie spezifische Enzyme) gemessen werden, um festzustellen, ob die Photosensitivität ein inakzeptables Niveau erreicht hat.ormelC8H18N2O4SD

ichte

1,07 g/mL bei 20 °CS

chmelzpunkt

Experimentatoren können die durch die HEPES-Photosensitivität verursachten Störungen durch mehrere Methoden reduzieren. Erstens, nach der Zubereitung der HEPES-haltigen Lösung, diese in Aluminiumfolie oder braunen Reagenzgläsern dunkel lagern und tägliche Lichteinwirkung vermeiden. Zweitens, während der Zellkultur und der Durchführung von Operationen, versuchen, unnötige Lichtquellen auszuschalten oder gelbe Leuchtstoffröhren mit Wellenlängenfilterung von blauem/UV-Licht zu verwenden. Drittens, für Langzeitbeobachtungen (wie die Lebendzellbildgebung), kann die Verwendung eines Puffersystems mit geringerer Photosensitivität wie PIPES (Piperazin-1,4-diethansulfonsäure) oder Phosphatpufferlösung in Betracht gezogen werden. PIPES hat eine deutlich schwächere Fähigkeit, unter Lichteinfluss reaktive Sauerstoffspezies zu erzeugen als HEPES. Viertens, wenn HEPES im Experiment nicht ersetzt werden kann, können Antioxidantien (wie Liponsäure, Trolox oder Natriumpyruvat) dem Puffer zugesetzt werden, um das durch Lichteinwirkung erzeugte Wasserstoffperoxid zu entfernen. Es sollte jedoch beachtet werden, ob die Antioxidantien selbst das Experiment stören. Fünftens, bei der Bewertung der Auswirkungen von HEPES kann eine Kontrolle eingerichtet werden: dieselbe Pufferlösung kann unter denselben Lichtbedingungen platziert und dann die Konzentration von Wasserstoffperoxid oder die Auswirkungen auf die Aktivität von Standardproben (wie spezifische Enzyme) gemessen werden, um festzustellen, ob die Photosensitivität ein inakzeptables Niveau erreicht hat.LagerungsbedingungenAuswirkungen auf biologische SystemeP

urheit

Mehr als 99%Standardverpackung

500g/Flasche, 25kg/Karton

Auswirkungen auf biologische SystemeHubei Xindesheng

Entdeckung und Mechanismus der Photosensitivität

Einige Labore haben beobachtet, dass Kulturmedien oder Puffer, die HEPES enthalten, nachteilige Auswirkungen auf bestimmte Zellen oder Biomoleküle haben können, wenn sie gewöhnlichem Innenlicht oder Leuchtstofflampen ausgesetzt sind. Weitere Forschungen haben gezeigt, dass HEPES-Moleküle selbst unter Lichteinfluss photochemische Reaktionen eingehen können. Insbesondere nachdem HEPES Licht einer bestimmten Wellenlänge (insbesondere blaues oder nahes UV-Licht im UV-Bereich) absorbiert hat, kann das Stickstoffatom an seinem Piperazinring angeregt werden und mit gelöstem Sauerstoff reagieren, um Wasserstoffperoxid zu erzeugen. Gleichzeitig können im Reaktionsprozess auch reaktive Sauerstoffspezies wie Superoxid-Anionen und Hydroxylradikale entstehen. Das Phänomen der lichtinduzierten Erzeugung reaktiver Sauerstoffspezies ist der Kernmechanismus der HEPES-Photosensitivität.HEPES-Puffer Auswirkungen auf biologische SystemeDie Erzeugung reaktiver Sauerstoffspezies hat potenzielle Auswirkungen auf verschiedene biologische Proben. Zum Beispiel kann in der Zellkultur selbst kurzzeitige Beleuchtung des Arbeitstisches zur Anreicherung von Wasserstoffperoxid im HEPES-Puffer-Medium führen. Wasserstoffperoxid kann oxidativen Stress in Zellen auslösen, was zu verringerter Zellviabilität, Apoptose oder abnormaler Aktivierung von Signalwegen führt. Bei primären Neuronen oder bestimmten empfindlichen Zelllinien ist dieser Effekt ausgeprägter. In der Proteinforschung können reaktive Sauerstoffspezies Methioninreste, Cysteinthiole oder Tryptophan-Seitenketten von Proteinen oxidieren, was zu Veränderungen der Enzymaktivität, Proteinaggregation oder Verlust von antigenen Epitopen führt. Bei Fluoreszenzexperimenten wie der Lebendzellbildgebung oder Luciferase-Assays kann HEPES unter Beleuchtung nicht nur Zellen schädigen, sondern auch Fluoreszenzfarbstoffe direkt löschen oder zu einer Erhöhung der Hintergrundfluoreszenz führen, was die Zuverlässigkeit der Daten beeinträchtigt. Darüber hinaus können einige Experimente, die Redoxzustände betreffen, unter Lichtbedingungen künstlich zusätzliche Oxidationssignale einführen, wenn HEPES verwendet wird, und dadurch die experimentellen Schlussfolgerungen beeinflussen.

Maßnahmen zur Vermeidung des Einflusses der Photosensitivität

Experimentatoren können die durch die HEPES-Photosensitivität verursachten Störungen durch mehrere Methoden reduzieren. Erstens, nach der Zubereitung der HEPES-haltigen Lösung, diese in Aluminiumfolie oder braunen Reagenzgläsern dunkel lagern und tägliche Lichteinwirkung vermeiden. Zweitens, während der Zellkultur und der Durchführung von Operationen, versuchen, unnötige Lichtquellen auszuschalten oder gelbe Leuchtstoffröhren mit Wellenlängenfilterung von blauem/UV-Licht zu verwenden. Drittens, für Langzeitbeobachtungen (wie die Lebendzellbildgebung), kann die Verwendung eines Puffersystems mit geringerer Photosensitivität wie PIPES (Piperazin-1,4-diethansulfonsäure) oder Phosphatpufferlösung in Betracht gezogen werden. PIPES hat eine deutlich schwächere Fähigkeit, unter Lichteinfluss reaktive Sauerstoffspezies zu erzeugen als HEPES. Viertens, wenn HEPES im Experiment nicht ersetzt werden kann, können Antioxidantien (wie Liponsäure, Trolox oder Natriumpyruvat) dem Puffer zugesetzt werden, um das durch Lichteinwirkung erzeugte Wasserstoffperoxid zu entfernen. Es sollte jedoch beachtet werden, ob die Antioxidantien selbst das Experiment stören. Fünftens, bei der Bewertung der Auswirkungen von HEPES kann eine Kontrolle eingerichtet werden: dieselbe Pufferlösung kann unter denselben Lichtbedingungen platziert und dann die Konzentration von Wasserstoffperoxid oder die Auswirkungen auf die Aktivität von Standardproben (wie spezifische Enzyme) gemessen werden, um festzustellen, ob die Photosensitivität ein inakzeptables Niveau erreicht hat.Produktverpackung

Schlussfolgerung