A fotossensibilidade do HEPES 7365-45-9 e o seu impacto nas experiências biológicas

Produto Aparência Ácido 4-Hidroxietilpiperazina Etanossulfônico

Químico

AbreviaçãoMolarNúmero

CAS

7365-45-9Aparência do

Produto

ConclusãoMassa Molar238.305

Fórmula

não significa que o tampão não possa ser usado, mas sim sugere que os pesquisadores precisam considerar fatores de iluminação ao projetar experimentos. Ao evitar a luz, controlar o tempo de exposição à luz, selecionar agentes tampão alternativos ou adicionar proteção antioxidante, a interferência de espécies reativas de oxigênio fotoinduzidas pode ser efetivamente reduzida. Compreender essa característica pode ajudar a obter dados experimentais reproduzíveis e confiáveis.FusãoDensidade1,07 g/mL a 20 °C

Ponto

não significa que o tampão não possa ser usado, mas sim sugere que os pesquisadores precisam considerar fatores de iluminação ao projetar experimentos. Ao evitar a luz, controlar o tempo de exposição à luz, selecionar agentes tampão alternativos ou adicionar proteção antioxidante, a interferência de espécies reativas de oxigênio fotoinduzidas pode ser efetivamente reduzida. Compreender essa característica pode ajudar a obter dados experimentais reproduzíveis e confiáveis.Fusão234-238 °CCondições

de

ArmazenamentoTemperatura ambiente, longe da luz e umidade

Pureza

não significa que o tampão não possa ser usado, mas sim sugere que os pesquisadores precisam considerar fatores de iluminação ao projetar experimentos. Ao evitar a luz, controlar o tempo de exposição à luz, selecionar agentes tampão alternativos ou adicionar proteção antioxidante, a interferência de espécies reativas de oxigênio fotoinduzidas pode ser efetivamente reduzida. Compreender essa característica pode ajudar a obter dados experimentais reproduzíveis e confiáveis.Embalagem Conclusão500g/frasco, 25kg/tambor de papelão

Fabricante

Hubei XindeshengDescoberta e mecanismo da fotossensibilidadeAlguns laboratórios observaram que meios de cultura ou tampões contendo HEPES podem ter efeitos adversos em certas células ou biomoléculas quando expostos à luz ambiente interna comum ou lâmpadas fluorescentes. Pesquisas adicionais mostraram que as próprias moléculas de HEPES podem sofrer reações fotoquímicas sob condições de luz. Especificamente, após o HEPES absorver luz de um comprimento de onda específico (especialmente luz azul ou ultravioleta próxima na região ultravioleta), o átomo de nitrogênio em seu anel de piperazina pode ser excitado e reagir com oxigênio dissolvido para gerar peróxido de hidrogênio. Enquanto isso, o processo de reação também pode gerar espécies reativas de oxigênio, como ânions superóxido e radicais hidroxila. O fenômeno da geração fotoinduzida de espécies reativas de oxigênio é o mecanismo central da fotossensibilidade do HEPES.

Tampão HEPES

ConclusãoA geração de espécies reativas de oxigênio tem impactos potenciais em várias amostras biológicas. Por exemplo, em cultura de células, mesmo a iluminação de curto prazo da bancada de trabalho pode levar ao acúmulo de peróxido de hidrogênio no meio tampão HEPES. O peróxido de hidrogênio pode induzir estresse oxidativo nas células, levando à diminuição da viabilidade celular, apoptose ou ativação anormal de vias de sinalização. Para neurônios primários ou certas linhagens celulares sensíveis, esse efeito é mais pronunciado. Em pesquisa de proteínas, espécies reativas de oxigênio podem oxidar resíduos de metionina, tióis de cisteína ou cadeias laterais de triptofano de proteínas, levando a alterações na atividade enzimática, agregação de proteínas ou perda de epítopos antigênicos. Para experimentos de fluorescência, como imagem de células vivas ou ensaios de luciferase, o HEPES sob iluminação pode não apenas danificar as células, mas também apagar diretamente corantes fluorescentes ou causar um aumento na fluorescência de fundo, interferindo na confiabilidade dos dados. Além disso, alguns experimentos envolvendo estados redox podem introduzir sinais de oxidação adicionais artificialmente sob condições de luz se o HEPES for usado, afetando assim as conclusões experimentais.

Medidas para evitar a influência da fotossensibilidade

Experimentadores podem reduzir a interferência causada pela fotossensibilidade do HEPES através de vários métodos. Primeiro, após preparar a solução contendo HEPES, use papel alumínio ou frascos de reagentes marrons para armazená-la no escuro e evitar a exposição diária à luz. Segundo, durante a cultura e operação de células, tente desligar fontes de iluminação desnecessárias ou usar lâmpadas de luz amarela com filtragem de comprimento de onda de luz azul/ultravioleta. Terceiro, para observação de longo prazo (como imagem de células vivas), pode-se considerar o uso de um sistema tampão com menor fotossensibilidade, como PIPES (ácido piperazina-1,4-dietanossulfônico) ou solução tampão fosfato. O PIPES tem uma capacidade significativamente menor de produzir espécies reativas de oxigênio sob luz do que o HEPES. Quarto, se o HEPES não puder ser substituído no experimento, antioxidantes (como ácido lipóico, Trolox ou piruvato de sódio) podem ser adicionados ao tampão para remover o peróxido de hidrogênio gerado pela exposição à luz. No entanto, deve-se notar se os próprios antioxidantes interferem no experimento. Quinto, ao avaliar o impacto do HEPES, um controle pode ser estabelecido: a mesma solução tampão pode ser colocada sob as mesmas condições de iluminação, e então a concentração de peróxido de hidrogênio ou o efeito na atividade de amostras padrão (como enzimas específicas) pode ser detectado para determinar se a fotossensibilidade atingiu um nível inaceitável.Embalagem do produtoConclusãoA fotossensibilidade do

tampão HEPES

não significa que o tampão não possa ser usado, mas sim sugere que os pesquisadores precisam considerar fatores de iluminação ao projetar experimentos. Ao evitar a luz, controlar o tempo de exposição à luz, selecionar agentes tampão alternativos ou adicionar proteção antioxidante, a interferência de espécies reativas de oxigênio fotoinduzidas pode ser efetivamente reduzida. Compreender essa característica pode ajudar a obter dados experimentais reproduzíveis e confiáveis.Como fabricante de tampão HEPES, a Desheng monitora rigorosamente a qualidade do produto e estabelece um departamento de qualidade para inspecionar lotes de produtos. Somente após a embalagem e a qualidade atenderem aos padrões, eles podem ser vendidos da fábrica. Portanto, a Desheng recebeu elogios unânimes dos clientes. Se você tiver alguma intenção relevante, clique no site para consultar detalhes e comprar!