Em testes bioquímicos clínicos, a detecção da actividade da alfa-amilase é um elemento de rotina para a triagem e diagnóstico de doenças pancreáticas.como substrato recomendado pela Federação Internacional de Química Clínica e Medicina de Laboratório, fornece um sistema de reação padronizado e quantificável para a detecção da amilase.Seu design estrutural inteligente e seu mecanismo de reação claro tornaram-se a base de esquemas de detecção amplamente utilizados em laboratórios clínicos.
Estrutura química e propriedades dos substratos
O nome químico completo do EPS-G7 é 4,6-etileno-p-nitrofenil - α - D-maltosídeo.É constituído por uma cadeia de maltose constituída por sete unidades de glicose ligadas a um grupo terminal de p-nitrobenzeno, com uma modificação de 4,6-etileno introduzida na extremidade não redutora.A aparência é de pó branco a amarelo claro com excelente solubilidade em águaO produto tem uma pureza superior a 95% e deve ser armazenado num ambiente escuro, seco e fechadoA duração de conservação é de 24 meses.
O princípio de detecção em duas etapas recomendado pela IFCC
O método de detecção do EPS-G7 como substrato segue o método de duas etapas acoplado por enzimas recomendado pela IFCC, com uma via de reação clara.A alfa amilase na amostra reconhece especificamente as moléculas do substrato EPS-G7, separa as ligações glicosídicas e gera produtos intermediários de p-nitrofenil maltooligossacarídeos.Ligação 4-glicosídica dentro da cadeia de açúcar, e após a clivagem, liberta fragmentos de oligossacarídeos de p-nitrofenil de diferentes comprimentos de cadeia.
Os produtos intermediários, tais como os oligossacarídeos de maltose de nitrobenzeno, não podem produzir diretamente sinais de cor detectáveis,e alfa-glucosidase devem ser adicionados como uma enzima auxiliar para hidrolizar ainda mais estes produtos intermediários e liberar quantitativamente p-nitrofenol livre amareloA função da α-glucosidase consiste em separar sequencialmente as unidades de glicose da extremidade não redutora da cadeia de oligossacarídeos, liberando completamente os grupos p-nitrofenilo.
Nesta reacção de uma ou duas etapas ligada à enzima, a modificação do 4,6-etileno na molécula do substrato desempenha um papel crucial.que impede eficazmente a hidrólise direta do substrato EPS-G7 intacto pela alfa-glucosidase, assegurando que a enzima indicadora só pode funcionar depois que a alfa-amilase rompe primeiro a cadeia de açúcar.Este mecanismo garante que os resultados da detecção possam refletir verdadeiramente a actividade da alfa-amilase na amostra, em vez da actividade de enzimas auxiliares.
Detecção e quantificação da absorção
O p-nitrofenol liberado da reação aparece amarelo em condições alcalinas e tem um pico de absorção característico a um comprimento de onda de 405 nanómetros.Monitorando continuamente a taxa de aumento da absorção durante o processo de reação, a produção de p-nitrofenol pode ser rastreada em tempo real.A taxa de alteração da absorção é directamente proporcional à concentração de actividade da alfa-amilase na amostra, e a actividade enzimática da amostra de ensaio pode ser calculada comparando-a com a curva padrão.
Garantia de fiabilidade dos resultados dos ensaios
A forte especificidade de reação do substrato EPS-G7 é devida à correspondência precisa da estrutura molecular do substrato com o centro activo da enzima.As recomendações da IFCC asseguram ainda a uniformidade dos métodos de ensaio e a comparabilidade dos resultados entre os diferentes laboratóriosPara cenários clínicos que exijam avaliação precisa da função pancreática e diferenciação do abdome agudo, os resultados de detecção fornecidos pelo substrato EPS-G7 têm um valor de referência claro.O substrato EPS-G7 produzido pela Xindesheng tem uma elevada pureza e boa estabilidade de lote, que podem satisfazer os rigorosos requisitos de qualidade do reagente em ensaios clínicos.
A Hubei Xindesheng Material Technology Company concluiu a investigação e as vendas do substrato EPS-G7, com tecnologia de produção madura e estável e boa qualidade do produto.Se tiver necessidades de aquisição relacionadas no futuro próximo, por favor clique no site oficial para mais detalhes ou entre em contato comigo diretamente!
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