Vergelijking en selectie van Tris-buffer met andere veelgebruikte biologische buffers

In biochemische en moleculaire biologische experimenten is het onderhouden van een stabiele pH-omgeving de basis voor succesvolle experimenten.biologische buffersbeschikbaar op de markt, met inbegrip van Tris, HEPES, MOPS, PBS en andere, die algemeen in laboratoria worden gebruikt.Het begrijpen van de verschillen tussen hen helpt bij het maken van meer redelijke keuzes tijdens de experimentele ontwerpfaseDit artikel vergelijkt Tris met andere veelgebruikte buffers uit verschillende dimensies.

Toepassingsgebied en beperkingen van Tris

Tris (Tris) is een van de meest gebruikte biologische bufferacties in het laboratorium.0Tris heeft opmerkelijke voordelen, zoals een goede oplosbaarheid, een gemakkelijke bereiding, een relatief lage kostprijs,en compatibiliteit met de meest gebruikte reagentiaDe pKa-waarde van Tris varieert aanzienlijk met de temperatuur.en bijzondere aandacht moet worden besteed aan de pH-kalibratie in experimentele omgevingen met grote temperatuurschommelingenBovendien bevat Tris vrije amino-groepen die kunnen reageren met kruisverbindende stoffen zoals glutaraldehyde, waardoor het ongeschikt is voor bepaalde fixatie- of etiketteringsexperimenten.In termen van eiwit kwantificatieTris kan de Bradford-methode verstoren, wat resulteert in bevooroordeelde resultaten.

trisbasispoeder

Kenmerken van HEPES en verschillen met Tris

HEPES is een andere veelgebruikte biologische buffer, met een effectief bufferbereik van pH 6,8 tot 8.2Een duidelijk voordeel van HEPES is de geringe temperatuurcoëfficiënt, met een relatief stabiele pH-waarde tussen 4 °C en 37 °C,In tegenstelling tot Tris die herhaalde temperatuur aanpassingen vereistHEPES heeft een zwakke chelatievermogen ten opzichte van metaalionen, waardoor het geschikt is voor enzymreactiesystemen die metaalionen bevatten.de prijs van HEPES is aanzienlijk hoger dan die van TrisHet is niet gemakkelijk te steriliseren door middel van een hoge drukbehandeling, meestal met behulp van filtratie sterilisatie.Als het experiment geen frequente temperatuurveranderingen vereist en de kosten een belangrijke overweging zijnTris is een goedkopere keuze.

Kenmerken en toepasselijke scenario's van MOPS

Het effectieve bufferbereik van MOPS is pH 6,5 tot 7.9Het heeft een breed scala aan toepassingen in RNA-elektrophoresis en is een veelvoorkomende keuze voor het bereiden van formaldehyde denaturerende gelbuffer.MOPS heeft ook een zwakke chelatievermogen ten opzichte van metaalionen en stoort niet met metaalcofactoren in het reactiesysteemIn vergelijking met Tris bevat MOPS geen amino-groepen, dus neemt het niet deel aan aldehyde-reacties en interfereert het niet met bepaalde chemische modificaties op basis van amino's.MOPS heeft voordelen op het gebied van oplosbaarheid en prijs ten opzichte van Tris, en het buffervermogen is ideaal bij een pH van ongeveer 7.0, waarna het effect afneemt.

Verschillen in toepassingsscenario's tussen PBS en Tris

Phosfaatbuffered zoutoplossing (PBS) is een ander veel gebruikt buffersysteem, gekenmerkt door niet-toxiciteit, lage kosten en een goede pH-stabiliteit.Een belangrijk probleem met PBS in vergelijking met Tris is dat fosfaat ionen neerslagstoffen kunnen vormen met divalente metaalionen zoals calcium en magnesium.PBS is ook niet geschikt als buffer voor metaalaffiniteitschromatografie,omdat fosfaten de binding van nikkelkolommen aan histidine gemarkeerde eiwitten kunnen verstorenIn deze scenario's is Tris een betere keuze.Maar PBS speelt een onvervangbare rol in immunologische experimenten en celwasoperaties omdat het onder fysiologische omstandigheden dichter bij de ionencompositie ligt..

Hoe de geschikte buffer volgens de experimentele vereisten wordt gekozen

Bij de keuze van een buffer kunnen de volgende factoren in aanmerking worden genomen: ten eerste wordt het voor het experiment vereiste pH-bereik gekozen,en een buffer met een pKa-waarde die dicht bij de werk pH ligt, wordt gekozen voor zijn sterkste buffercapaciteitAls het experiment op een constante temperatuur wordt uitgevoerd, is Tris volledig in staat.De derde is de situatie van de metaalionen in het systeem.Als het experiment de deelname van magnesium-, calcium- en mangaanionen vereist, moeten fosfaatsystemen worden vermeden.Tris heeft een hoge kosteneffectiviteit in routine-experimenten en vereist geen buitensporige reagenskosten vanwege het streven naar hoge zuiverheid..

Verpakking van het product

Conclusies

Elk buffermiddel heeft zijn eigen toepasselijke scenario's en niemand kan andere soorten volledig vervangen.Tris is de basisconfiguratie van laboratoria geworden vanwege zijn brede toepassingsmogelijkheden en economische werking., maar onder specifieke omstandigheden kunnen HEPES, MOPS of PBS betere keuzes zijn.Het begrijpen van de kenmerken van deze buffermiddelen en hun flexibele selectie volgens de specifieke vereisten van verschillende experimenten is een redelijke methode..

Als fabrikant vantrihydroxymethylaminomethane, Desheng kan meer dan 99% van de grondstof poeders leveren met stabiele prestaties en kleine batch verschillen, die zeer wordt erkend door de markt.Klik op de website om te vragen over details en aankoop!