Сравнение и выбор Трис-буфера с другими часто используемыми биологическими буферами

В биохимических и молекулярных биологических экспериментах, поддержание стабильной pH среды является основой для успешных экспериментов.биологические буферыимеются на рынке, включая Tris, HEPES, MOPS, PBS и другие, которые обычно используются в лабораториях.И понимание различий между ними помогает сделать более разумный выбор во время фазы экспериментального проектирования.Эта статья сравнивает Трис с другими широко используемыми буферами из нескольких измерений.

Сфера применения и ограничения Tris

Трис (Tris) является одним из наиболее широко используемых биологических буферных агентов в лаборатории.0Трис обладает выдающимися преимуществами, такими как хорошая растворимость, простота приготовления, относительно низкая стоимость,и совместимость с наиболее часто используемыми реагентамиНо есть и некоторые ограничения, которые необходимо отметить.и особое внимание следует уделять калибровке pH в экспериментальных условиях с большими колебаниями температурыКроме того, Tris содержит свободные аминогруппы, которые могут реагировать с агентами с перекрестными связями, такими как глутаралдегид, что делает его непригодным для определенных экспериментов по фиксации или маркировке.С точки зрения количественного определения белка, Трис может вмешиваться в метод Брэдфорда, что приводит к предвзятым результатам.

трис-база порошок

Характеристики HEPES и отличия от Tris

HEPES - еще один широко используемый биологический буфер с эффективным буферным диапазоном pH от 6,8 до 8.2Одним из очевидных преимуществ HEPES является его небольшой температурный коэффициент с относительно стабильным значением pH в диапазоне от 4 до 37 °C.В отличие от Триса, который требует повторных температурных корректировок.HEPES обладает слабой способностью к хелатированию в отношении ионов металлов, что делает его подходящим для ферментальных реакционных систем, содержащих ионы металлов.цена на HEPES значительно выше, чем на Tris, и не легко стерилизуется обработкой под высоким давлением, обычно с использованием фильтрационной стерилизации.Если эксперимент не требует частых изменений температуры и стоимость является важным соображениемТрис - более экономичный выбор.

Характеристики и применимые сценарии MOPS

Эффективный буферный диапазон MOPS составляет pH от 6,5 до 7.9Он имеет широкий спектр применений в РНК электрофорезе и является распространенным выбором для приготовления формальдегида денатурирующего гелевого буфера.MOPS также обладает слабой способностью хелатировать ионы металлов и не влияет на кофакторы металлов в реакционной системеПо сравнению с Tris, MOPS не содержит аминогрупп, поэтому он не участвует в альдегидных реакциях и не вмешивается в определенные химические модификации на основе аминокислот.MOPS имеет преимущества с точки зрения растворимости и цены по сравнению с Tris, а его буферная способность идеальна при pH около 7.0, после чего эффект уменьшится.

Различия в сценариях применения между PBS и Tris

Фосфатный буферизированный солевой раствор (PBS) является еще одной широко используемой буферической системой, характеризующейся нетоксичностью, низкой стоимостью и хорошей стабильностью pH.Значительная проблема с ПБС по сравнению с Tris заключается в том, что фосфатные ионы могут образовывать осаждения с дивалентными ионами металлов, такими как кальций и магний.ПБС также не подходит в качестве буфера для хроматографии аффинности металлов,поскольку фосфаты могут мешать связыванию никелевых колонн с протеинами, помеченными гистидиномВ этих сценариях Трис более подходящий выбор.Но ПБС играет незаменимую роль в иммунологических экспериментах и операциях по промывке клеток, потому что он ближе к ионному составу в физиологических условиях..

Как выбрать подходящий буфер в соответствии с экспериментальными требованиями

При выборе буфера можно учитывать следующие факторы: во-первых, выбирается диапазон pH, необходимый для эксперимента,и буфер с значением pKa, близким к рабочему pH, выбирается для его наиболее сильной буферной способностиЕсли эксперимент проводится при постоянной температуре, Трис полностью способна. Если температура часто меняется, HEPES или MOPS могут быть более подходящими.Третий - ситуация с ионами металлов в системе.Если эксперимент требует участия ионов магния, кальция и марганца, следует избегать фосфатных систем.Трис имеет высокую экономическую эффективность в обычных экспериментах и не требует чрезмерных расходов на реагенты из-за стремления к высокой чистоте..

Опаковка продукта

Заключение

Каждый буферный агент имеет свои применимые сценарии, и никто не может полностью заменить другие сорта.Tris стала базовой конфигурацией лабораторий из-за ее широкого применения и экономичности., но при определенных условиях HEPES, MOPS или PBS могут быть лучшим выбором.Понимание характеристик этих буферных агентов и гибкий их выбор в соответствии со специфическими требованиями различных экспериментов является разумным методом..

Как производительтригидроксиметиламинометан, Desheng может поставлять более 99% порошков сырья с стабильной производительностью и небольшими различными партиями, что высоко признано рынком.Пожалуйста, нажмите на веб-сайт, чтобы узнать о деталях и покупке!