다른 일반적으로 사용되는 생물학적 버퍼와 트리스 버퍼의 비교 및 선택

생화학 및 분자생물학 실험에서 안정적인 pH 환경을 유지하는 것이 성공적인 실험의 기초입니다.생물학적 버퍼시장에서 사용할 수 있는, Tris, HEPES, MOPS, PBS 및 다른, 모두 실험실에서 일반적으로 사용. 각 버퍼는 자신의 적용 범위와 제한이 있습니다.그리고 그 사이의 차이점을 이해하는 것은 실험 설계 단계에서 더 합리적인 선택을 할 수 있습니다.이 기사에서는 트리스를 여러 차원의 다른 일반적으로 사용되는 버퍼와 비교합니다.

Tris 적용 범위 및 제한

트리스 (Tris) 는 실험실에서 가장 널리 사용되는 생물학적 완충제 중 하나입니다. 그것의 효과적인 완충 범위는 pH 7.0에서 9 사이입니다.0많은 생화학 실험의 작업 조건을 정확하게 다루고 있습니다. Tris는 좋은 용해성, 쉬운 준비, 비교적 저렴한 비용,가장 일반적으로 사용되는 반응기와 호환성하지만 몇 가지 한계도 있습니다. 트리스의 pKa 값은 온도에 따라 크게 변합니다.그리고 큰 온도 변동이 있는 실험 환경에서의 pH 측정에 특별한 주의를 기울여야 합니다.또한, Tris는 glutaraldehyde와 같은 교차 결합 물질과 반응할 수 있는 자유 아미노 그룹을 함유하고 있어 특정 고정 또는 라벨링 실험에 적합하지 않습니다.단백질 수치의 관점에서트리스는 브래드포드 방법을 방해해서 편향된 결과를 얻을 수 있습니다.

트리스 염기 분말

HEPES의 특징과 Tris의 차이점

HEPES는 다른 일반적으로 사용되는 생물학적 버퍼이며, 효과적인 버퍼 범위는 pH 6.8에서 8입니다.2, 부분적으로 Tris 간격과 겹치는 것. HEPES의 명백한 장점 중 하나는 4 °C에서 37 °C 범위 내에서 비교적 안정적인 pH 값을 갖는 작은 온도 계수입니다.트리스와 달리 반복적인 온도 조절이 필요합니다.HEPES는 금속 이온에 대한 약한 켈레이팅 능력을 가지고 있으며, 금속 이온을 포함하는 효소 반응 시스템에 적합합니다. HEPES는 종종 세포 배양에서 보조 버퍼로 사용됩니다.HEPES의 가격은 Tris보다 훨씬 높습니다., 고압 처리에 의해 쉽게 살균되지 않습니다. 일반적으로 필터레이션 살균을 사용합니다.실험이 빈번한 온도 변화를 요구하지 않는 경우 비용은 중요한 고려 사항입니다트리스는 더 경제적인 선택입니다.

MOPS의 특성 및 적용 가능한 시나리오

MOPS의 효과적 완충 범위는 pH 6.5 ~ 7입니다.9, 약간 더 산성. 그것은 RNA 전자기에서 광범위한 응용 프로그램을 가지고 있으며 포름알데히드 분화 젤 버퍼를 준비하는 데 일반적인 선택입니다.MOPS는 또한 금속 이온에 대한 약한 켈레이팅 능력을 가지고 있으며 반응 시스템에서 금속 코팩터에 간섭하지 않습니다.. 트리스와 비교하면 MOPS는 아미노 그룹을 포함하지 않으므로 알데히드 반응에 참여하지 않으며 특정 아미노 기반 화학 변형에 간섭하지 않습니다.MOPS는 Tris에 비해 용해성과 가격 측면에서 장점이 있습니다., 그리고 그 펌퍼 능력은 pH 7 주위에서 이상적입니다.0, 그 이상의 효과는 감소합니다.

PBS와 Tris의 적용 시나리오의 차이

인산염 완충 염분 (PBS) 은 독성이 없고 저렴한 비용과 pH 안정성이 좋은 또 다른 널리 사용되는 완충 시스템이다.트리스와 비교했을 때 PBS의 중요한 문제는 인산화 이온이 칼슘과 마그네슘과 같은 이성 금속 이온과 퇴적물을 형성할 수 있다는 것입니다.이 이온이 필요한 실험 시스템에 적합하지 않습니다. PBS는 또한 금속 친밀성 염색체 촬영에 버퍼로 적합하지 않습니다.인산화합물은 니켈 기둥이 히스티딘로 표시된 단백질에 결합하는 것을 방해할 수 있기 때문에이런 상황에서는 트리스가 더 적합한 선택입니다.하지만 PBS는 면역학 실험과 세포 세척 작업에서 대체할 수 없는 역할을 합니다. 생리적 조건 하에서 이온 구성에 가깝기 때문입니다..

실험 요구 사항에 따라 적절한 버퍼를 선택하는 방법

버퍼를 선택할 때 다음 요인을 고려할 수 있습니다. 첫째, 실험에 필요한 pH 범위가 선택됩니다.그리고 작동 pH에 가까운 pKa 값을 가진 버퍼가 가장 강한 버퍼 능력을 위해 선택됩니다.다음으로 온도 조건이 있습니다. 실험이 일정한 온도에서 수행되면 Tris는 완전히 가능합니다. 온도가 자주 변하면 HEPES 또는 MOPS가 더 적합 할 수 있습니다.세 번째는 시스템 내의 금속 이온 상황입니다.실험에 마그네슘, 칼슘 및 망간 이온의 참여가 필요한 경우 인산화탄소 시스템을 피해야합니다. Tris 또는 HEPES는 더 나은 선택입니다. 마지막으로 비용 요인이 있습니다.트리스는 일상 실험에서 높은 비용 효율성을 가지고 있으며 높은 순수성을 추구하기 때문에 과도한 반응기 비용을 필요로하지 않습니다..

제품 포장

결론

각 버퍼 에이전트는 적용 가능한 각본을 가지고 있으며 다른 품종을 완전히 대체 할 수는 없습니다.트리스는 광범위한 적용 가능성과 경제성으로 인해 연구소의 기본 구성이되었습니다., 하지만 특정 조건 하에, HEPES, MOPS, 또는 PBS는 더 나은 선택이 될 수 있습니다.이러한 펌퍼 에이전트의 특성을 이해하고 다른 실험의 특정 요구 사항에 따라 유연하게 선택하는 것은 합리적인 방법입니다..

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