Συζήτηση σχετικά με την αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας του αποθέτη HEPES

Όνομα Cροϊόντος

Οξύ 4-Υδροξυαιθυλοπιπεραζίνης αιθανοσουλφονικό

Χημική ροϊόντοςυντομογραφία

Ρυθμιστικό διάλυμα HEPES

Αριθμός CAS

7365-45-9

Σκόνη HEPESΠροϊόντοςΛευκή κρυσταλλική σκόνη

Μοριακό

Εκτός από τη χημική αποικοδόμηση, οι διαδικασίες υψηλής θερμοκρασίας μπορεί επίσης να αλλοιώσουν τη ρυθμιστική ικανότητα του HEPES. Ο συντελεστής μεταβλητότητας του pKa του HEPES με τη θερμοκρασία είναι περίπου -0.014/° C, πράγμα που σημαίνει ότι όταν η θερμοκρασία αυξάνεται από 25 ° C σε 121 ° C, το pKa θα μειωθεί κατά περίπου 1.3 μονάδες. Μετά την αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας, το ρυθμιστικό διάλυμα ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου και το pKa του μπορεί να αποκατασταθεί. Ωστόσο, εάν παραχθούν προϊόντα αποικοδόμησης, αυτά τα προϊόντα μπορεί να έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά διάστασης, με αποτέλεσμα μείωση της ρυθμιστικής ικανότητας κοντά στο επιθυμητό pH. Εάν οι πειραματιστές δεν προσέξουν αυτήν την αλλαγή, μπορεί να παρερμηνεύσουν τη σταθερότητα του pH του πειραματικού συστήματος.C8H18N2O4S238.305Μοριακός

Τ

Εκτός από τη χημική αποικοδόμηση, οι διαδικασίες υψηλής θερμοκρασίας μπορεί επίσης να αλλοιώσουν τη ρυθμιστική ικανότητα του HEPES. Ο συντελεστής μεταβλητότητας του pKa του HEPES με τη θερμοκρασία είναι περίπου -0.014/° C, πράγμα που σημαίνει ότι όταν η θερμοκρασία αυξάνεται από 25 ° C σε 121 ° C, το pKa θα μειωθεί κατά περίπου 1.3 μονάδες. Μετά την αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας, το ρυθμιστικό διάλυμα ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου και το pKa του μπορεί να αποκατασταθεί. Ωστόσο, εάν παραχθούν προϊόντα αποικοδόμησης, αυτά τα προϊόντα μπορεί να έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά διάστασης, με αποτέλεσμα μείωση της ρυθμιστικής ικανότητας κοντά στο επιθυμητό pH. Εάν οι πειραματιστές δεν προσέξουν αυτήν την αλλαγή, μπορεί να παρερμηνεύσουν τη σταθερότητα του pH του πειραματικού συστήματος.C8H18N2O4SΠυκνότητα1.07 g/mL στους 20 °C

Σημείο

Τήξης

234-238 °C

Εκτός από τη χημική αποικοδόμηση, οι διαδικασίες υψηλής θερμοκρασίας μπορεί επίσης να αλλοιώσουν τη ρυθμιστική ικανότητα του HEPES. Ο συντελεστής μεταβλητότητας του pKa του HEPES με τη θερμοκρασία είναι περίπου -0.014/° C, πράγμα που σημαίνει ότι όταν η θερμοκρασία αυξάνεται από 25 ° C σε 121 ° C, το pKa θα μειωθεί κατά περίπου 1.3 μονάδες. Μετά την αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας, το ρυθμιστικό διάλυμα ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου και το pKa του μπορεί να αποκατασταθεί. Ωστόσο, εάν παραχθούν προϊόντα αποικοδόμησης, αυτά τα προϊόντα μπορεί να έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά διάστασης, με αποτέλεσμα μείωση της ρυθμιστικής ικανότητας κοντά στο επιθυμητό pH. Εάν οι πειραματιστές δεν προσέξουν αυτήν την αλλαγή, μπορεί να παρερμηνεύσουν τη σταθερότητα του pH του πειραματικού συστήματος.ΑΣκόνη HEPESΘερμοκρασία δωματίου, μακριά από φως και υγρασία

Καθαρότητα

Περισσότερο από 99%Τυπική Σ

υσκευασία

Σκόνη HEPESΚατασκευαστής

Hubei Xindesheng

Χαρακτηριστικά θερμικής σταθερότητας του HEPESΑπό χημική άποψη δομής, τα μόρια HEPES περιέχουν έναν δακτύλιο πιπεραζίνης και μια πλευρική αλυσίδα αιθανοσουλφονικού οξέος. Σε θερμοκρασία δωματίου, η στερεή μορφή σκόνης του HEPES είναι σχετικά σταθερή και μπορεί να αποθηκευτεί για μεγάλο χρονικό διάστημα. Ωστόσο, όταν διαλύεται σε νερό και θερμαίνεται πάνω από 100 ° C, ορισμένα μόρια μπορεί να υποστούν θερμική αποικοδόμηση. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι το διάλυμα HEPES μπορεί να υποστεί αντιδράσεις υδρόλυσης ή οξείδωσης υπό συνθήκες υψηλής θερμοκρασίας και υψηλής πίεσης, παράγοντας μικρές ποσότητες ακαθαρσιών. Για παράδειγμα, το άτομο αζώτου στον δακτύλιο πιπεραζίνης μπορεί να υποστεί πρωτονίωση σε υψηλές θερμοκρασίες, οδηγώντας σε αντιδράσεις με διαλυμένο οξυγόνο ή άλλα συστατικά. Η υψηλή θερμοκρασία μπορεί επίσης να επιταχύνει τη συμπλοκοποίηση του HEPES με ιχνοστοιχεία μετάλλων όπως ο σίδηρος και ο χαλκός, τα οποία μπορεί να παρεμβληθούν στην ενζυμική δραστηριότητα ή στην κυτταρική ανάπτυξη σε μεταγενέστερα πειράματα.Σκόνη HEPESΠραγματικές πειραματικές παρατηρήσεις έχουν δείξει ότι το ρυθμιστικό διάλυμα HEPES που αποστειρώνεται με ατμό υψηλής πίεσης στους 121 ° C υφίσταται μερικές φορές τις ακόλουθες αλλαγές: το χρώμα του διαλύματος αλλάζει από άχρωμο σε ανοιχτοκίτρινο ή ανοιχτοκαφέ. μετατοπίζεται η τιμή του PH (συνήθως μειώνεται ελαφρώς). εμφανίζεται μια νέα κορυφή απορρόφησης στο φάσμα απορρόφησης UV στο εύρος των 240-300 nm. Αυτά τα φαινόμενα υποδεικνύουν την παραγωγή προϊόντων αποικοδόμησης. Παρόλο που η συγκέντρωση των προϊόντων αποικοδόμησης είναι συνήθως χαμηλή, αυτές οι αλλαγές μπορεί να έχουν σημαντικές επιπτώσεις σε ορισμένα εξαιρετικά ευαίσθητα πειραματικά συστήματα, όπως η κυτταρική καλλιέργεια, οι δοκιμές κινητικής ενζύμων ή η φασματοσκοπική ανάλυση.

Ο αντίκτυπος της αποστείρωσης υψηλής θερμοκρασίας στην ρυθμιστική ικανότητα

Εκτός από τη χημική αποικοδόμηση, οι διαδικασίες υψηλής θερμοκρασίας μπορεί επίσης να αλλοιώσουν τη ρυθμιστική ικανότητα του HEPES. Ο συντελεστής μεταβλητότητας του pKa του HEPES με τη θερμοκρασία είναι περίπου -0.014/° C, πράγμα που σημαίνει ότι όταν η θερμοκρασία αυξάνεται από 25 ° C σε 121 ° C, το pKa θα μειωθεί κατά περίπου 1.3 μονάδες. Μετά την αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας, το ρυθμιστικό διάλυμα ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου και το pKa του μπορεί να αποκατασταθεί. Ωστόσο, εάν παραχθούν προϊόντα αποικοδόμησης, αυτά τα προϊόντα μπορεί να έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά διάστασης, με αποτέλεσμα μείωση της ρυθμιστικής ικανότητας κοντά στο επιθυμητό pH. Εάν οι πειραματιστές δεν προσέξουν αυτήν την αλλαγή, μπορεί να παρερμηνεύσουν τη σταθερότητα του pH του πειραματικού συστήματος.Προτεινόμενη μέθοδος αποστείρωσης

Δεδομένων των πιθανών κινδύνων αποικοδόμησης που σχετίζονται με την αποστείρωση υψηλής θερμοκρασίας και υψηλής πίεσης, τα περισσότερα εργαστήρια συνιστούν τη χρήση εναλλακτικών μεθόδων για την ασηπτική επεξεργασία του ρυθμιστικού διαλύματος HEPES.