タンパク質の浄化中に安定したpH環境を維持することは 標的タンパク質の活動を保護するための基礎です異なる浄化方法とタンパク質サンプルには,バッファシステムに対する要求が異なります..BIS-TRIS, MOPS, PIPES, TES, Tris HClおよび他の6つのバッファ溶液にはそれぞれ特定の適用可能なシナリオと使用注意事項があります.
BIS-TRIS: 多機能電泳バッファ
BIS-TRISの有効バッファリング範囲は pH 5.8 から 7 です.2電気泳に関するアプリケーションでは優れた性能があります. 電気泳のバッファ,ゲルバッファ,サンプルバッファとして様々なタイプの電気泳実験に使用できます.また,ACESバッファと組み合わせてジェル電解の実行バッファとして使用できます.また,アガロースゲル電解とアニオン交換染色体学,NMRスペクトロスコピーおよびX線結晶学実験にも適しています.BIS-TRISはヒト肝臓脂肪酸結合タンパク質と相互作用するため,使用中に注意する必要があります.鉛と銅イオンと強い複合体を形成し,これらの金属イオンを含むシステムでは慎重に使用する必要があります.
MOPS と PIPES: 染色体検査による浄化のための共通選択
MOPSのバッファリング範囲は pH 6.5 から 7 です.9主にタンパク質浄化のための染色体測定方法に使用される.MOPSを使用する際には,牛血清アルブミン (bovine serum albumin) のペプチド骨盤と相互作用することが注意すべきです.タンパク質の安定性に影響を与える可能性があります.
PIPES のバッファリング範囲は pH 6.1 から 7 です.5タンパク質浄化のための染色体測定方法でも一般的に使用されています.PIPESの顕著な特徴の一つは,ほとんどの金属イオンとケラートを形成する能力がないことです.金属イオンを含む溶液の非調整バッファとして適しているこの特性により,金属イオンを含む実験システムに干渉することなく,金属タンパク質の浄化や金属イオンを含む実験においてユニークな利点を得ることができます.
TES: 多重染色体検査技術の適用性
TESのバッファリング範囲は pH 6.8 から 8 です.2酵素活性分析,ゲルフィルタリング染色体検査および親密性染色体検査においてバッファシステムとして使用することができる.アニオン交換染色体ターゲットタンパク質の分離と浄化に役立つ安定したpH環境を提供します.TES は二酸化酸のタンパク質決定方法には適していないことに注意し,ブラッドフォード染料結合方法のタンパク質決定結果にも干渉する可能性があります.タンパク質定量化方法を選択する際には,これらの2つの検出システムを避ける必要があります.
Tris HCl: SDS-PAGE の主要な成分
Tris HClのバッファ範囲は pH 7.0 から 9.0塩基帯に傾いている.水恐性の相互作用染色体学では,分離および透析溶液の成分として使用される.Tris HCl は,イオン交換染色体検査のサンプル充填段階と親密性染色体検査の基質溶液において,pH 安定性を維持する役割も果たしている.最もよく知られている応用は,LaemmliバッファシステムのコアコンポーネントであるSDS-PAGEにおける電球分解バッファおよびゲルバッファの構成要素として使用されています.
タンパク質浄化バッファを選択する際には,標的タンパク質の特性,浄化方法の要件,そして,その後の検出の互換性バッファーのpH範囲が標的タンパク質の安定範囲をカバーするか,金属イオンと相互作用するか,タンパク質の定量化方法に 干渉するかどうかは 実践的な作業でバランスを取らなければならない要素です適切なバッファシステムを選択することで,タンパク質浄化実験の安定した環境保証ができます.
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