단백질 정화 과정에서 안정적인 pH 환경을 유지하는 것이 표적 단백질의 활동을 보호하는 기초입니다.다른 정화 방법과 단백질 샘플은 버퍼 시스템에 대한 다른 요구 사항이 있습니다..BIS-TRIS, MOPS, PIPES, TES, Tris HCl 및 다른 6 개의 버퍼 솔루션은 각각 특정 적용 가능한 시나리오와 사용 예방 조치를 가지고 있습니다.
BIS-TRIS: 다기능 전극분석 버퍼
BIS-TRIS의 효과적인 버퍼 범위는 pH 5. 8 ~ 7입니다.2, 그리고 그것은 전소분석 관련 응용 프로그램에서 탁월한 성능을 발휘합니다. 그것은 전소분석 버퍼, 젤 버퍼 및 샘플 버퍼로 사용할 수 있습니다.또한 ACES 버퍼와 결합하여 젤 전자기술의 실행 버퍼로 사용될 수 있습니다.그것은 또한 아가로스 젤 전소분석 및 아니온 교환 염색체, 그리고 NMR 분광 및 X-선 결정학 실험에 적합합니다.BIS- TRIS는 인간 간 지방산 결합 단백질과 상호 작용하기 때문에 사용 중에 주의해야 합니다.또한 납 및 구리 이온과 강한 복합체를 형성하며 이러한 금속 이온을 포함하는 시스템에서 신중하게 사용해야합니다.
MOPS 및 PIPES: 크로마토그래픽 정화에 대한 일반적인 선택
MOPS의 버퍼 범위는 pH 6.5에서 7입니다.9, 주로 단백질 정화를 위한 염색학적 방법에서 사용됩니다. MOPS를 사용할 때 소액 알부민의 펩타이드 척추와 상호 작용 할 수 있음을 유의해야합니다.단백질의 안정성에 영향을 줄 수 있습니다..
PIPES의 버퍼 범위는 pH 6.1에서 7입니다.5, 또한 단백질 정화를 위한 염색체학적 방법에도 일반적으로 사용된다. PIPES의 대표적인 특징 중 하나는 대부분의 금속 이온과 함께 켈라트를 형성할 능력이 없다는 것이다.금속 이온을 함유한 용액에서 비조정 버퍼로 적합하게 만드는이 특성은 금속 이온을 포함하는 실험 시스템을 방해하지 않고 금속 단백질 정화 또는 금속 이온을 포함하는 실험에서 독특한 장점을 제공합니다.
TES: 다중 염색체 기술 적용 가능성
TES의 버퍼링 범위는 pH 6.8에서 8입니다.2, 대부분의 생리적 pH 조건을 포함합니다. 효소 활동 분석, 젤 필터레이션 크로마토그래피 및 afinity 크로마토그래피에서 버퍼 시스템으로 사용될 수 있습니다.아니온 교환 염색체, TES는 목표 단백질의 분리 및 정화에 도움이되는 안정적인 pH 환경을 제공할 수 있습니다.TES는 다이오프손산의 단백질 결정 방법에 적합하지 않으며 브래드포드 염료 결합 방법의 단백질 결정 결과에 영향을 줄 수 있다는 점에 유의해야합니다.단백질 정량 측정 방법을 선택할 때 이 두 가지 검출 시스템을 피해야합니다.
Tris HCl: SDS-PAGE의 주요 구성 요소
트리스 HCl의 버퍼 범위는 pH 7.0에서 9입니다.0, 알칼리 범위를 향해 기울입니다. 수소공성 상호 작용 염색체 촬영에서 분리 및 투석 용액의 구성 요소로 사용됩니다.트리스 HCl는 또한 이온 교환 염색법의 샘플 로딩 단계와 친밀성 염색법의 기판 용액에서 pH 안정성을 유지하는 역할을 합니다.가장 잘 알려진 응용 프로그램은 SDS-PAGE에서 전기 분해 버퍼 및 젤 버퍼의 구성 요소로 Laemmli 버퍼 시스템의 핵심 구성 요소입니다.
단백질 정화 버퍼를 선택할 때 대상 단백질의 특성, 정화 방법의 요구 사항,그리고 후속 검출의 호환성- 버퍼의 pH 범위가 목표 단백질의 안정적 범위를 커버하는지, 금속 이온과 상호 작용하는지,그리고 일반적으로 사용되는 단백질 정량 측정 방법과 간섭하는 지는 실제 작업에서 균형 잡아야 할 모든 요소입니다.올바른 버퍼 시스템을 선택하면 단백질 정화 실험에 안정적인 환경 보장을 제공할 수 있습니다.
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