Toepassing en voorzorgsmaatregelen van HEPES in nucleïnezuur-gerelateerde experimenten

HEPES, De volledige naam is 4-hydroxyethyl piperazineethanesulfonzuur ook bekend als 4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonzuur, met een CAS-nummer van 7365-45-9. Als een niet-vluchtige zwitterionische chemische buffer wordt HEPES algemeen beschouwd als een van de uitstekende universele buffers op het gebied van biologisch onderzoek. Het behoort tot de beroemde Good's biologische bufferreagensfamilie en heeft een uitstekend buffervermogen onder fysiologische pH-omstandigheden.

HEPES (Cell Culture Grade) producten, onafhankelijk ontwikkeld en geproduceerd door Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd., worden veel gebruikt in wetenschappelijke onderzoeks- en productiegebieden zoals celkweek, eiwitzuivering, moleculaire biologie, enz., met hoge zuiverheid, lage endotoxinen en stabiel proces als hun kernvoordelen.

1. Basis informatie

1.1 Chemische en buffereigenschappen

1.2 Bufferprestaties

De pKa-waarde van HEPES is ongeveer 7,5 (25 ° C) en het effectieve bufferebereik is pH 6,8-8,2. Het vertoont een sterk buffervermogen in het pH-bereik van 6,0-8,5. Vooral in het fysiologische bereik van pH 7,2-7,4, optimaal voor celkweek, is de buffercapaciteit veel hoger dan die van fosfaat- of carbonaatbuffers.

Hepes verpakking 

Als lid van de Good's bufferfamilie bezit HEPES uitstekende eigenschappen zoals hoge wateroplosbaarheid, lage celmembraanpermeabiliteit, stabiele zuur-base dissociatieconstante, laag metaalionchelatievermogen, hoge chemische stabiliteit en lage absorptie in het UV- en zichtbare lichtgebied.

2. Kernvoordelen

2.1 Een buffersysteem dat niet afhankelijk is van CO ₂

Traditionele celkweekmedia zijn afhankelijk van een bicarbonaat/CO ₂ buffersysteem om de pH-balans te handhaven. Zodra de CO ₂ incubator wordt geopend, zullen er ernstige pH-schommelingen optreden. De buffercapaciteit van HEPES is onafhankelijk van de CO ₂ concentratie. Wanneer cellen worden verdeeld in flesjes, gepasseerd of microscopisch worden waargenomen in een veiligheidskast, kan het kweekmedium dat HEPES bevat de pH-stabiliteit in een open omgeving gedurende enkele uren handhaven, waardoor cellen effectief worden beschermd tegen schade door een alkalisch milieu.

2.2 Uitstekende biocompatibiliteit

Bij typische werkconcentraties (10-25 mM) vertoont HEPES een goede tolerantie voor de meeste cellijnen en heeft het geen significante toxische effecten op cellen. HEPES heeft chemische en enzymatische stabiliteit en kan celmembranen niet penetreren, waardoor het zeer geschikt is voor toevoeging aan celkweekmedia.

2.3 Uitstekende temperatuurstabiliteit

In tegenstelling tot Tris en andere buffers vertoont de pKa-waarde van HEPES minimale temperatuurvariatie (-0,014/° C) en handhaaft het een stabiele buffercapaciteit binnen het experimentele temperatuurbereik van 4 ° C tot 37 ° C. Dit kenmerk stelt het in staat om de structuur en functie van het enzym goed te handhaven, zelfs bij lage temperaturen.

2.4 Vriendelijk voor metaalionen

HEPES cheleert niet met gangbare metaalionen zoals Ca ² ⁺ en Mg ² ⁺, en interfereert niet met enzymactiviteit die afhankelijk is van metaalionen, waardoor het geschikt is voor experimentele systemen met betrekking tot metaalionen.

3. Toepassingsscenario's

3.1  Celkweek

HEPES wordt veel gebruikt in de kweek van zoogdiercellen, weefseltechnologie en ander onderzoek. De veelgebruikte werkconcentratie is 10-25 mM. Vergeleken met anorganische bicarbonaatbuffersystemen vertoont HEPES een superieure pH-regeling bij weefsel- of orgaankweek. Vooral in scenario's waar cellen lange tijd buiten de CO ₂ incubator moeten worden verwerkt, kan het toevoegen van HEPES de buffercapaciteit van het kweekmedium aanzienlijk verbeteren. De conventionele kweek, langdurige incubatie, evenals celkruip- en Transwell-migratie/invasie-experimenten van gevoelige cellen (zoals primaire cellen, stamcellen, tumorcellen) kunnen worden gehandhaafd door HEPES toe te voegen om celhomeostase te behouden.

3.2  Eiwitzuivering en -extractie

HEPES is een veelgebruikt onderdeel van bindingsbuffers en lys buffers in eiwitononderzoek. Het heeft een breed scala aan toepassingen in biologische processen zoals de zuivering van antilichamen, bioactieve stoffen, eiwitten en groeifactoren.

3.3  Elektroforese en Moleculaire Biologie

HEPES kan worden gebruikt in gel-elektroforesebuffers, DNA/RNA-manipulatie en andere moleculaire biologie-experimenten.

3.4  Andere toepassingen

HEPES kan ook worden gebruikt als een bifasische elektrolytoplossing voor isoelektrische focusseringselektroforese, een buffersysteem voor het observeren van eiwitafzetting onder elektronenmicroscopie, en een bufferreagens voor de kwantitatieve en selectieve bepaling van antigeen-antilichaamreacties.

HEPES bufferpoeder

4. Nieuwe Desheng HEPES Productspecificaties en Kwaliteitscontrole

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. werd opgericht in 2005 en is een nationale hightechonderneming die gespecialiseerd is in de onderzoeks-, ontwikkelings-, productie- en verkoop van in vitro diagnostische reagentia en biologische bufferagentia. Het bedrijf heeft rijke technische accumulatie op het gebied van biologische bufferagentia, met producten die tientallen veelgebruikte en aangepaste soorten omvatten, zoals TRIS, HEPES, MOPS, enz., met een dagelijkse productiecapaciteit van maximaal 5 ton.

Productkenmerken van Desheng

Hoge zuiverheid: De zuiverheid van celkweekkwaliteit HEPES kan meer dan 99% bereiken

Lage endotoxinen: Strikte endotoxinecontrole-indicatoren zorgen voor een soepel verloop van celkweekexperimenten

Poedervorm: Gemakkelijk langdurig op te slaan en te transporteren. Bij gebruik gedeïoniseerd water toevoegen en roeren om op te lossen. Op de gewenste pH-waarde brengen met natriumhydroxide. Gemakkelijk te bereiden

Goede batchstabiliteit: een strikt kwaliteitscontrolesysteem zorgt voor consistente prestaties van producten uit verschillende batches

kwaliteitsborging

Xindesheng houdt zich aan de bedrijfsfilosofie van "kwaliteit voorop, klantgericht" en zijn producten worden strikt getest volgens industrienormen. Het bedrijf bouwt actief aan een nieuwe fabriek in Huanggang, toegewijd aan het creëren van een binnenlandse basis voor hoogwaardige biologische bufferagentia, en het verder verbeteren van de productiecapaciteit en de garantievermogens van de toeleveringsketen.

5. Voorzorgsmaatregelen

5.1 HEPES raadt een werkconcentratie van 10-25 mM aan. Een lage concentratie is onvoldoende om pH-schommelingen effectief te beheersen, terwijl een hoge concentratie toxiciteit kan veroorzaken voor bepaalde gevoelige cellen.

5.2 HEPES kan interfereren met Folin Ciocalteu eiwitkwantificatie-experimenten, maar zal de Biuret eiwitkwantificatie-analyse niet beïnvloeden.

5.3 Het product wordt verpakt in niet-steriele verpakking. Indien gebruikt voor celkweek, wordt aanbevolen om voor gebruik steriele filtratie uit te voeren.

5.4 Het wordt aanbevolen om op kamertemperatuur te bewaren, uit de buurt van licht, vocht, en in een afgesloten en droge omgeving.

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. zet zich in voor het leveren van hoogwaardige biologische bufferproducten voor de wereldwijde life science-onderzoeks- en in vitro diagnostische industrie. Als u meer wilt weten over onze producten of monsters wilt verkrijgen, neem dan op elk moment vrijblijvend contact met ons op.