Aplicación y precauciones del HEPES en experimentos relacionados con ácidos nucleicos

HEPES,El nombre completo esÁcido 4-hidroxietil piperazina etanosulfónico también conocido como ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazine-etanosulónico, con número CAS 7365-45-9.El HEPES es ampliamente considerado como uno de los excelentes tampones universales en el campo de la investigación biológicaPertenece a la famosa familia de reactivos biológicos de amortiguación del Good y tiene una excelente capacidad de amortiguación en condiciones de pH fisiológico.

Los productos HEPES (grado de cultivo celular) desarrollados y producidos de forma independiente por Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd.se utilizan ampliamente en campos de investigación científica y producción como el cultivo de células, purificación de proteínas, biología molecular, etc., con alta pureza, baja endotoxina y proceso estable como sus principales ventajas.

1. Información básica

1.1 Propiedades químicas y de amortiguación

1.2 Rendimiento del tampón

El valor de pKa de HEPES es de aproximadamente 7,5 (25 °C) y el rango de amortiguación eficaz es de pH 6,8-8.2Muestra una fuerte capacidad de amortiguación en el rango de pH de 6.0 a 8.5Especialmente en el rango fisiológico de pH 7,2-7,4 óptimo para el cultivo celular, su capacidad de amortiguación es mucho mayor que la de las soluciones amortiguadoras de fosfato o carbonato.

Embalaje de hepes

Como miembro de la familia de amortiguadores del Good, el HEPES posee excelentes características tales como alta solubilidad en agua, baja permeabilidad a la membrana celular, constante estable de disociación ácido-base,baja capacidad de quelación de iones metálicos, alta estabilidad química y baja absorción en las regiones de luz UV y visible.

2Ventajas fundamentales

2.1 Un sistema de amortiguación que no dependa del CO₂

Los medios de cultivo de células tradicionales dependen de un bicarbonato/CO₂El sistema de amortiguación para mantener el equilibrio del pH.₂La capacidad de amortiguación del HEPES es independiente del CO₂Cuando las células se dividen en viales, pasan o se observan microscópicamente en un gabinete de bioseguridad,el medio de cultivo que contiene HEPES puede mantener la estabilidad del pH en un ambiente abierto durante varias horas, protegiendo eficazmente las células de los daños causados por el ambiente alcalino.

2.2 Excelente biocompatibilidad

En concentraciones de trabajo típicas (10-25 mM), el HEPES muestra una buena tolerancia a la mayoría de las líneas celulares y no tiene efectos tóxicos significativos en las células.El HEPES tiene estabilidad química y enzimática y no puede penetrar las membranas celulares, por lo que es muy adecuado para la adición a los medios de cultivo celular.

2.3 Excelente estabilidad a la temperatura

A diferencia de Tris y otras soluciones tampón, el valor de pKa de HEPES muestra una variación mínima de temperatura (-0.014/° C) y mantiene una capacidad de amortiguación estable dentro del rango de temperatura experimental de 4 ° C a 37 ° C.Esta característica le permite mantener bien la estructura y la función de la enzima incluso en condiciones de baja temperatura.

2.4 Amigable a los iones metálicos

El HEPES no se quela con iones metálicos comunes como el Ca 2+y Mg 2+, y no interfiere con la actividad enzimática dependiente de los iones metálicos, por lo que es adecuado para sistemas experimentales relacionados con los iones metálicos.

3.Escenarios de aplicación

3.1 Cultivo celular

El HEPES se utiliza ampliamente en cultivos celulares de mamíferos, ingeniería de tejidos y otras investigaciones.El HEPES muestra una capacidad superior de control del pH en cultivos de tejidos u órganos. Especialmente en escenarios en los que las células necesitan ser procesadas fuera del CO₂El cultivo convencional, la incubación a largo plazo, la incubación a largo plazo, la incubación a largo plazo, la incubación a largo plazo, la incubación a largo plazo, la incubación a largo plazo, la incubación a largo plazo.Además de los experimentos de rastreo celular y de migración/invasión transwell de células sensibles (como las células primarias), células madre, células tumorales) se pueden mantener añadiendo HEPES para mantener la homeostasis celular.

3.2 Purificación y extracción de proteínas

El HEPES es un componente de amortiguador de unión y amortiguador de lisis comúnmente utilizado en la investigación de proteínas. Tiene una amplia gama de aplicaciones en procesos biológicos como la purificación de anticuerpos, sustancias bioactivas,Proteínas, y factores de crecimiento.

3.3 Electroforesis y biología molecular

El HEPES se puede utilizar en el tampón de electroforesis de gel, manipulación de ADN / ARN y otros experimentos de biología molecular.

3.4 Otras aplicaciones

El HEPES también se puede utilizar como solución de electrolito bifásico para la electroforesis de enfoque isoeléctrico, un sistema tampón para observar la deposición de proteínas bajo microscopía electrónica,y un reactivo tampón para la determinación cuantitativa y selectiva de las reacciones de anticuerpos al antígeno.

Polvo de amortiguación de HEPES

4Nuevas especificaciones de producto y control de calidad de Desheng HEPES

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. se estableció en 2005 y es una empresa nacional de alta tecnología especializada en investigación, desarrollo, producción,y ventas de reactivos de diagnóstico in vitro y agentes biológicos tamponesLa empresa tiene una rica acumulación técnica en el campo de los agentes de amortiguación biológicos, con productos que cubren docenas de tipos comúnmente utilizados y personalizados como TRIS, HEPES, MOPS, etc.con una capacidad de producción diaria de hasta 5 toneladas.

Características del producto Desheng

Alta pureza: La pureza del grado de cultivo celular HEPES puede alcanzar más del 99%

Baja endotoxina: los indicadores estrictos de control de endotoxinas aseguran el progreso sin problemas de los experimentos de cultivo celular

Forma en polvo: fácil de almacenar y transportar durante mucho tiempo. Cuando se utiliza, añadir agua desionizada y revuelva para disolver. Ajustar al valor de pH deseado con hidróxido de sodio. Fácil de preparar

Buena estabilidad del lote: un estricto sistema de control de calidad garantiza el rendimiento constante de los productos de diferentes lotes

garantía de la calidad

Xindesheng se adhiere a la filosofía empresarial de "la calidad primero, orientada al cliente", y sus productos se prueban estrictamente de acuerdo con los estándares de la industria.La compañía está construyendo activamente una nueva fábrica en Huanggang, se comprometió a crear una base nacional de agentes biológicos tampones de alta gama y a mejorar aún más la capacidad de producción y las capacidades de garantía de la cadena de suministro.

5. Precauciones

5.1 El HEPES recomienda una concentración de trabajo de 10-25 mM. Una concentración baja no es suficiente para controlar eficazmente las fluctuaciones del pH,Mientras que una alta concentración puede causar toxicidad a ciertas células sensibles.

5.2 El HEPES puede interferir con los experimentos de cuantificación de proteínas de Folin Ciocalteu, pero no afectará al análisis de cuantificación de proteínas de Biuret.

5.3 El producto está en un embalaje no estéril; si se utiliza para cultivos celulares, se recomienda realizar una filtración estéril antes de su uso.

5.4 Se recomienda conservar a temperatura ambiente, lejos de la luz y la humedad, y en un ambiente sellado y seco.

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. se compromete a proporcionar productos de amortiguador biológico de alta calidad para la investigación mundial en ciencias biológicas y la industria del diagnóstico in vitro.Si necesita saber más acerca de nuestros productos o obtener muestrasSiéntase libre de contactarnos en cualquier momento.