Anwendung und Vorsichtsmaßnahmen von HEPES in Nukleinsäureversuchen

HEPES,Der vollständige Name ist4-Hydroxyethylpiperazinethansulfonsäure auch als 4- (2-Hydroxyethyl) -1-Piperazinethanesulonsäure bekannt, mit CAS-Nummer 7365-45-9. Als nichtflüchtiger zwitterionischer chemischer PufferHEPES gilt allgemein als einer der hervorragenden universellen Puffer im Bereich der biologischen ForschungEs gehört zur berühmten Familie der biologischen Pufferreagenzien von Good und weist unter physiologischen pH-Bedingungen eine ausgezeichnete Pufferfähigkeit auf.

HEPES (Cell Culture Grade) -Produkte, die von Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. unabhängig entwickelt und hergestellt wurden.sind in wissenschaftlichen Forschungs- und Produktionsbereichen wie Zellkultur weit verbreitet, Proteinreinigung, molekulare Biologie usw. mit hoher Reinheit, geringem Endotoxin und stabilem Prozess als ihre Hauptvorteile.

1. Grundlegende Informationen

1.1 Chemische und Puffer-Eigenschaften

1.2 Pufferleistung

Der pKa-Wert von HEPES beträgt etwa 7,5 (25 °C) und der effektive Pufferbereich beträgt pH 6,8-8.2Es weist eine starke Pufferfähigkeit im pH-Bereich von 6,0-8 auf.5Insbesondere im physikalischen Bereich von pH 7,2-7,4, der für die Zellkultur optimal ist, ist seine Pufferfähigkeit viel höher als die von Phosphat- oder Carbonatpufferlösungen.

Verpackungen für Hepes

Als Bestandteil der Good's-Pufferfamilie weist HEPES hervorragende Eigenschaften auf, wie hohe Wasserlöslichkeit, geringe Zellmembrandurchlässigkeit, stabile Säure-Basen-Dissoziationskonstante,niedrige Chelatfähigkeit von Metallionen, hohe chemische Stabilität und geringe Absorption in UV- und sichtbarem Licht.

2Hauptvorteile

2.1 Ein Puffersystem, das nicht auf CO angewiesen ist₂

Bei herkömmlichen Zellkulturmedien wird ein Bicarbonat/CO verwendet.₂Einmal das CO₂Die Pufferkapazität von HEPES ist unabhängig von CO₂Wenn Zellen in Durchstechflaschen aufgeteilt, durchzogen oder mikroskopisch in einem Biosicherheitsschrank beobachtet werden,das HEPES enthaltende Kulturmedium kann den pH-Wert in einer offenen Umgebung mehrere Stunden lang stabil halten, die Zellen wirksam vor Schäden durch alkalische Umgebung schützt.

2.2 Ausgezeichnete Biokompatibilität

Bei typischen Arbeitskonzentrationen (10-25 mM) zeigt HEPES eine gute Toleranz gegenüber den meisten Zelllinien und hat keine signifikanten toxischen Wirkungen auf die Zellen.HEPES ist chemisch und enzymatisch stabil und kann nicht in die Zellmembranen eindringen, so dass es sich hervorragend für die Zugabe von Zellkulturmedien eignet.

2.3 Ausgezeichnete Temperaturbeständigkeit

Im Gegensatz zu Tris und anderen Pufferlösungen zeigt der pKa-Wert von HEPES eine minimale Temperaturvariation (-0.014/° C) und eine stabile Pufferleistung im Versuchstemperaturbereich von 4 °C bis 37 °C aufrechterhält.Diese Eigenschaft ermöglicht es ihm, die Struktur und Funktion des Enzyms auch bei niedrigen Temperaturen gut zu erhalten.

2.4 Freundlich gegenüber Metallionen

HEPES chelatiert nicht mit üblichen Metallionen wie Ca 2+und Mg 2+, und beeinträchtigt nicht die auf Metallionen abhängige Enzymaktivität, so dass es für Versuchssysteme mit Metallionen geeignet ist.

3.Anwendungsfälle

3.1 Zellkultur

HEPES wird häufig in Säugetierzellkulturen, Gewebetechnik und anderen Forschungsarbeiten eingesetzt.HEPES weist in Gewebe- oder Organkulturen eine überlegene pH-Kontrolle auf. vor allem in Szenarien, in denen Zellen außerhalb des CO₂HEPES kann die Pufferkapazität des Kulturmediums erheblich erhöhen.sowie Zellcrawling und Transwell-Migration/Invasion von empfindlichen Zellen (wie z.B. Primärzellen), Stammzellen, Tumorzellen) erhalten werden kann, indem HEPES hinzugefügt wird, um die Zellhomöostase zu erhalten.

3.2 Proteinreinigung und -extraktion

HEPES ist ein häufig verwendeter Bindungspuffer und Lysepufferbestandteil in der Proteinforschung.Eiweiß, und Wachstumsfaktoren.

3.3 Elektrophorese und Molekularbiologie

HEPES kann in Gel-Elektrophorese-Puffer, DNA/RNA-Manipulation und anderen Molekularbiologie-Experimenten verwendet werden.

3.4 Andere Anwendungen

HEPES kann auch als zweiphasige Elektrolytlösung für die isoelektrische Fokussierungselektrophorese, ein Puffersystem zur Beobachtung von Proteinablagerungen unter Elektronenmikroskopie,und ein Pufferreagenz zur quantitativen und selektiven Bestimmung von Antigen-Antikörperreaktionen.

HEPES Pufferpulver

4. Neue Desheng HEPES Produktspezifikationen und Qualitätskontrolle

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. wurde 2005 gegründet und ist ein nationales Hightech-Unternehmen, das sich auf Forschung, Entwicklung, Produktion,und der Verkauf von in-vitro-diagnostischen Reagenzien und biologischen PuffermittelnDas Unternehmen verfügt über eine umfangreiche technische Erfahrung im Bereich biologischer Puffermittel, wobei die Produkte Dutzende von häufig verwendeten und kundenspezifischen Typen wie TRIS, HEPES, MOPS usw. abdecken.mit einer Produktionskapazität von bis zu 5 Tonnen pro Tag.

Produktmerkmale von Desheng

Hohe Reinheit: Die Reinheit von HEPES-Zellkulturen kann über 99% erreichen.

Niedriges Endotoxin: Strenge Indikatoren zur Endotoxinkontrolle sorgen für einen reibungslosen Ablauf von Zellkulturversuchen

Pulverform: Leicht zu lagern und lange zu transportieren. Beim Gebrauch entjoniertes Wasser hinzufügen und auflösen.

Gute Batchstabilität: ein strenges Qualitätskontrollsystem gewährleistet eine gleichbleibende Leistung der Produkte aus verschiedenen Chargen

Qualitätssicherung

Xindesheng hält sich an die Geschäftsphilosophie "Qualität zuerst, kundenorientiert" und seine Produkte werden streng nach Industriestandards getestet.Das Unternehmen baut aktiv eine neue Fabrik in Huanggang.Die Kommission hat sich verpflichtet, eine inländische Basis für hochwertige biologische Puffermittel zu schaffen und die Produktionskapazität und die Kapazitäten der Lieferkette weiter zu verbessern.

5.Vorsichtsmaßnahmen

5.1 HEPES empfiehlt eine Arbeitskonzentration von 10-25 mM. Eine niedrige Konzentration reicht nicht aus, um pH-Fluctuationen wirksam zu kontrollieren.während eine hohe Konzentration für bestimmte empfindliche Zellen Toxizität verursachen kann.

5.2 HEPES kann Folin Ciocalteu-Proteinquantifizierungsexperimente beeinträchtigen, beeinträchtigt jedoch die Biuret-Proteinquantifizierungsanalyse nicht.

5.3 Das Erzeugnis ist in einer nicht sterilen Verpackung; wenn es zur Zellkultur verwendet wird, wird empfohlen, vor Gebrauch eine sterile Filtration durchzuführen.

5.4 Es wird empfohlen, bei Raumtemperatur, fern von Licht und Feuchtigkeit und in einer geschlossenen und trockenen Umgebung zu lagern.

Die Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. hat sich verpflichtet, hochwertige biologische Pufferprodukte für die weltweite Biowissenschaftsforschung und die In-vitro-Diagnostikindustrie bereitzustellen.Wenn Sie mehr über unsere Produkte erfahren oder Proben erhalten möchtenBitte kontaktieren Sie uns jederzeit.