Необходимое чтение в лаборатории: Действительно ли Трис Баффер изменяется?

Буфер Трис является широко используемым реагентом многими исследователями в биохимических и молекулярно-биологических экспериментах. У многих может возникнуть вопрос: будет ли этот буфер испаряться в воздух, как спирт или эфир? Сегодня мы систематически проанализируем летучие характеристики буферного раствора Трис с трех точек зрения: химической структуры, физических свойств и фактической экспериментальной проверки, чтобы помочь вам более спокойно использовать и хранить реагент.

Физические свойства являются важной основой для определения летучести веществ. В условиях нормальной температуры и давления буфер Трис представляет собой прозрачную жидкую систему. Температура плавления чистого Трис составляет около 168-172 °C, а температура кипения превышает 219 °C (некоторые данные показывают, что температура разложения также относительно высока). Как водный раствор, буфер Трис имеет температуру кипения между чистой водой (100 °C) и чистым продуктом Трис, но в целом он по-прежнему относится к жидкостям с высокой точкой кипения. Летучесть обычно тесно связана с давлением пара вещества: чем выше давление пара вещества, тем легче оно переходит в газообразное состояние при комнатной температуре. Сам Трис имеет очень низкое давление пара при комнатной температуре, что означает, что его молекулы слабо способны отрываться от поверхности жидкости. Даже если молекулы воды в буфере будут медленно испаряться (что является естественным физическим процессом воды), растворенное в воде вещество Трис не попадет в воздух вместе с ним. Другими словами, наблюдаемое в повседневном использовании явление понижения уровня жидкости или «высыхания» в основном связано с потерей воды, а не с летучестью Трис. Если оставить открытым на длительное время, в конечном итоге останутся кристаллы Трис или сухой остаток, что точно доказывает нелетучую природу самого Трис.,

Экспериментальное подтверждение: отсутствие запаха при комнатной температуре, ограниченное изменение после нагревания

Чтобы далее подтвердить поведение буфера Трис при испарении, в лаборатории были проведены соответствующие проверочные наблюдения. Поместите 50 мл раствора буфера Трис (обычная концентрация, например, 0,1 моль/л, pH 8,0) в открытый стакан при комнатной температуре и давлении (примерно 25 °C, стандартное атмосферное давление) и наблюдайте непрерывно в течение 72 часов. Экспериментаторы по обонянию определили, что над стаканом в течение всего процесса не было явного запаха, а сам Трис является без запаха соединением, что указывает на отсутствие ощутимых летучих веществ, попадающих в воздух. В то же время, используя прецизионные электронные весы для взвешивания изменения массы системы, было обнаружено, что снижение массы в основном соответствует кривой скорости испарения воды, а количество испарения колеблется в зависимости от влажности окружающей среды. При нагревании раствора до 60 °C (близко к обычной температуре реакции, но не до точки кипения) над стаканом не было обнаружено никаких характерных сигналов Трис (например, с помощью газовой хроматографии или масс-спектрометрии), только присутствие водяного пара. Даже при нагревании почти до кипения испарение Трис очень ограничено, что соответствует его высокой точке кипения и сильной гидрофильности. В другом контрольном эксперименте использовался равный объем раствора этанола, и при комнатной температуре отчетливо ощущался запах, а масса быстро уменьшалась. В сравнении стабильность буферного раствора Трис была более выраженной.

Резюме и рекомендации по использованию