É imprescindível ler no laboratório: A Tris Buffer realmente se volatiliza?

O tampão Tris é um reagente comumente usado por muitos pesquisadores em experimentos de bioquímica e biologia molecular.Este amortecedor vai evaporar no ar como álcool ou éterHoje, vamos analisar sistematicamente as características de volatilidade deTris tampãosolução de três perspectivas: estrutura química, propriedades físicas e verificação experimental real, para ajudá-lo a usar e armazenar o reagente com mais tranquilidade.

1,Análise da estrutura química: grupos hidrófilos dominam, com uma baixa tendência à evaporação

A estrutura molecular do Tris (trihidroximetilaminometano) contém três grupos hidroxilo (- OH) e um grupo amino (- NH 2).Estes grupos funcionais têm forte hidroflicidade e podem formar redes estáveis de ligação de hidrogênio com moléculas de águaEspecificamente, os elétrons de par solitário em grupos hidroxilo e amino podem atrair átomos de hidrogênio em moléculas de água, enquanto seus próprios átomos de hidrogênio também podem interagir com átomos de oxigênio na água.Esta forte força intermolecular torna as moléculas Tris mais propensas a "ancorar" em torno de moléculas de água em soluçãoDo ponto de vista energético, as moléculas de Tris precisam superar forças significativas de ligação de hidrogênio para escapar da superfície da fase líquida,que reduz naturalmente a sua probabilidade de volatilizaçãoEm contraste, muitos solventes orgânicos (como a acetona e o cloroformo) não possuem grupos hidrofílicos fortes na sua estrutura molecular,resultando em forças intermoleculares mais fracas e tornando-as mais voláteisEntão, a julgar apenas pela sua estrutura química, o tampão Tris não tem uma clara tendência inerente a evaporar.

Tris base em pó

2,Exploração de propriedades físicas: dupla protecção de ponto de ebulição elevado e pressão de vapor baixa

As propriedades físicas são uma base importante para determinar a capacidade de volatilização de substâncias.O ponto de fusão da Tris pura é cerca de 168-172 ° C., e o seu ponto de ebulição é superior a 219 °C (alguns dados mostram que a sua temperatura de decomposição também é relativamente elevada).O tampão Tris tem um ponto de ebulição entre a água pura (100 °C) e o produto Tris puroA volatilidade é geralmente estreitamente relacionada com a pressão de vapor de uma substância: quanto maior a pressão de vapor de uma substância, maior a volatilidade.Quanto mais fácil for transformar-se num estado gasoso à temperatura ambienteE a própria Tris tem uma pressão de vapor muito baixa à temperatura ambiente, o que significa que as suas moléculas têm uma fraca capacidade de se separarem da superfície do líquido.Mesmo que as moléculas de água no tampão vão evaporar lentamente (que é um processo físico natural da água), o Tris dissolvido em água não entrará no ar junto com ele.O fenômeno de queda ou "seco" do nível do líquido observado na utilização diária deve-se principalmente à perda de água.Se deixado aberto por muito tempo, os cristais Tris ou resíduos secos acabarão por permanecer, o que prova precisamente a natureza não volátil da própria Tris.

3,Observação de verificação experimental: inodoro à temperatura ambiente, alteração limitada após aquecimento

A fim de confirmar ainda mais o comportamento de volatilização do tampão Tris, o laboratório realizou observações de validação correspondentes.Colocar 50 ml de solução tampão de Tris (concentração comum como 0.1 mol/l, pH 8,0) num copo aberto a temperatura e pressão ambiente (aproximadamente 25 °C, pressão atmosférica normal) e monitorizado continuamente durante 72 horas.Os experimentadores julgaram através do seu olfato que não havia nenhum odor óbvio acima do copo durante todo o processo, e a própria Tris era um composto inodoro, indicando que não havia substâncias voláteis perceptíveis no ar.utilizando uma balança eletrónica de precisão para pesar a mudança de massa do sistema, verificou-se que a diminuição da massa corresponde principalmente à curva da taxa de evaporação da água e que a quantidade de evaporação flutua com a umidade ambiental.Quando a solução é aquecida a 60 °C (perto da temperatura de reacção comum, mas não do ponto de ebulição), nenhum sinal característico de Tris pode ser detectado acima do copo (como por cromatografia de gás ou análise de espectrometria de massa), apenas a presença de vapor de água.A volatilização do Tris é muito limitada - em conformidade com o seu elevado ponto de ebulição e forte hidrofilidadeO outro experimento de controlo utilizou um volume igual de solução de etanol, e o cheiro podia ser claramente sentido e a qualidade diminuiu rapidamente à temperatura ambiente.a estabilidade da solução tampão Tris foi mais proeminente.

Resumo e sugestões de utilização

Com base na análise acima, pode concluir-se que o soluto de Tris na solução tampão de Tris não evapora no ar e é inodoro e seguro à temperatura ambiente;Mesmo se houver uma diminuição do líquido durante o armazenamento ou utilização diáriaPor isso, não precisa de se preocupar com a deriva da concentração ou a poluição ambiental causada pela volatilização da Tris.para assegurar a precisão da concentração do tampão, recomenda- se fechar imediatamente o frasco após utilização para evitar uma perda excessiva de humidade.A água desionizada pode ser adicionada proporcionalmente e misturada novamente.Para soluções de tampão Tris que exigem armazenamento a longo prazo, refrigeração selada é uma escolha mais confiável.