Application du sel de sodium de l'HEPES dans le kit de test de luminescence par fluorescence en flux (Partie 1)

Sel de sodium HEPES (numéro CAS 75277-39-3), nom chimique N - (2-hydroxyéthyl) piperazine-N '- (2-acide éthylsulfonique) sel de sodium, formule moléculaire C₈H est₁N₂- Je ne sais pas.₄Le sel de sodium HEPES appartient à la famille des tampons du Good, avec un pKa de 7,5 à 25°Cet une plage de tamponnage efficace de pH 6,8-8.2Cette plage tampon couvre précisément la plage de pH requise pour la grande majorité des réactions physiologiques et diagnostiques in vitro.ce qui en fait un composant de base des systèmes tampons largement utilisés dans des domaines tels que la culture cellulaire, les produits biopharmaceutiques et les réactifs de diagnostic.

HEPES sodiqueLe sel présente de multiples avantages physico-chimiques uniques: sa capacité de liaison aux ions métalliques est extrêmement faible et il ne se lie pas aux ions métalliques bivalents tels que le magnésium, le calcium et le manganèse.Haute transparence optique, très faible absorption dans les régions visible et ultraviolette, n'interfère pas avec la détection de la fluorescence; faible cytotoxicité, supérieure aux agents tampons traditionnels tels que le Tris et le phosphate;Bonne stabilité à la température et variation minimale du pH avec la températureCes caractéristiques confèrent au sel de sodium HEPES une place irremplaçable dans les kits de diagnostic in vitro impliquant la détection par fluorescence.

Introduction à la méthode de luminescence par fluorescence de flux

L'essai de luminescence par fluorescence de flux est une technique de détection des articulations à indices multiples en développement rapide dans le domaine du diagnostic in vitro (IVD) ces dernières années.Comparé à la détection par chimioluminescence traditionnelle d'un seul élément, la détection par fluorescence par cytométrie de flux peut détecter simultanément plusieurs éléments et présente l'avantage d'un débit élevé.la stabilité du système tampon détermine directement l'efficacité de la réaction des anticorps antigéniques, l'état de dispersion des microsphères et l'intensité et la reproductibilité du signal fluorescent.

Application spécifique du sel de sodium HEPES dans le kit de fluorescence pour la cytométrie de flux

Actuellement, plusieurs kits de détection de cytométrie de flux approuvés utilisent le tampon de sel de sodium HEPES comme composant principal. Voici deux exemples représentatifs:

Kit de détection de l'antigène du carcinome épidermoïde (méthode de fluorescence fluorescence de la cytométrie de flux):

Dans la composition du kit, le réactif d'anticorps recouvert de microsphère (A) comprend des microsphères recouvertes d'anticorps SCCA (souris) et de tampon de sel de sodium HEPES;Le réactif d'anticorps à la biotine (B) contient des anticorps SCCA biotinylés (souris) et un tampon de sel de sodium HEPESLe produit doit être conservé dans le noir à 2-8 °C.°Cet a une durée de conservation de 12 mois.

Kit de détection des cytokines (méthode de cytométrie par fluorescence fluorescente):

Ce kit est principalement utilisé cliniquement pour surveiller l'état immunitaire et la réponse inflammatoire de l'organisme.Le réactif d'anticorps recouvert de microsphères (A) contient six types de microsphères d'anticorps recouvertes et un tampon de sel de sodium HEPES.Les échantillons d'étalonnage (CAL2-CAL6) et les échantillons de contrôle de qualité (QCL) ont été analysés et les échantillons ont été analysés.Le QCH) est également basé sur le tampon de sel de sodium HEPES..

Formule typique du sel de sodium HEPES en solution tampon

Dans les applications pratiques, le sel de sodium HEPES est souvent utilisé en combinaison avec d'autres composants pour construire un système tampon complet.Le tampon utilisé pour la détection de fluorescence par cytométrie de débit comprend généralement un tampon de baseLe tampon de base comprend un ou plusieurs tampons Tris, MES, CBS, PBS et HEPES.La concentration de solutes dans le tampon de base est généralement de 50 à 100 mM., et la valeur du pH est de 7,3-7.5.

Dans les applications classiques de la cytométrie de débit et de la détection par fluorescence, les formulations courantes de tampon HEPES comprennent: 10mM HEPES, 150mM NaCl, 3mM EDTA, 0,05% Tween 20, pH 7.0; ou 10mM HEPES, 136mM NaCl, 2,7mM KCl, 2mM MgCl₂, 5,5 mM de glucose, 0,1% d' ASB, pH 7.35.

À partir des propriétés physico-chimiques du sel de sodium HEPES, cet article présente systématiquement ses scénarios d'application spécifiques dans les kits d'analyse de fluorescence de cytométrie de flux.L'article suivant explorera les principaux avantages technologiques du sel de sodium HEPES dans la détection de fluorescence par cytométrie de débit à partir des dimensions de la plage de tampon de pH, la chélation des ions métalliques, la transparence optique, l'inertie chimique et la cytotoxicité.les principaux paramètres et les suggestions d'approvisionnement pour la sélection des matières premières seront fournis, fournissant une référence pour la sélection des matières premières et le contrôle de la qualité des entreprises de production de kits de réactifs.