Anwendung von HEPES-Natriumsalz im Durchfluss-Fluoreszenz-Luminiszenz-Testkit (Teil 1)

HEPES Natriumsalz (CAS-Nummer 75277-39-3), chemische Bezeichnung N - (2-Hydroxyethyl) Piperazine-N '- (2-Ethylsulfonsäure) Natriumsalz, Formel C₈H₁N₂NaO₄HEPES-Natriumsalz gehört zur Bufferfamilie des Goods mit einem pKa von 7,5 bei 25°Cund einen effektiven Pufferbereich von pH 6,8-8.2Dieser Pufferbereich deckt genau den für die meisten physiologischen und in vitro-diagnostischen Reaktionen erforderlichen pH-Bereich ab.so dass es ein Kernbestandteil von Puffersystemen ist, die in Bereichen wie Zellkultur weit verbreitet sind, Biopharmazeutika und diagnostische Reagenzien.

HEPES NatriumSalz weist mehrere einzigartige physikalisch-chemische Vorteile auf: Es hat eine extrem geringe Bindungsfähigkeit an Metallionen und bindet nicht an divalente Metallionen wie Magnesium, Kalzium und Mangan.Hohe optische Transparenz, extrem geringe Absorption in sichtbaren und ultravioletten Regionen, beeinträchtigt nicht die Fluoreszenzdetektion; geringe Zytotoxizität, überlegen gegenüber herkömmlichen Puffermitteln wie Tris und Phosphat;Gute Temperaturstabilität und minimale pH-Variation mit der TemperaturDiese Eigenschaften verleihen HEPES-Natriumsalz eine unersetzliche Stellung in In-vitro-Diagnosekits mit Fluoreszenzdetektion.

Einführung in die Fluoreszenz-Lumineszenzmethode

Der Flow Fluorescence Luminescence Assay ist eine in den letzten Jahren rasch entwickelte Multi-Index-Gelenkdetektionstechnik auf dem Gebiet der In-vitro-Diagnostik (IVD).Verglichen mit der herkömmlichen ChemilumineszenzdetektionDie Fluoreszenzdetektion der Durchflusszytometrie kann mehrere Gegenstände gleichzeitig erkennen und hat den Vorteil eines hohen Durchsatzes.Die Stabilität des Puffersystems bestimmt direkt die Effizienz der Antigen-Antikörperreaktion, der Dispersionszustand der Mikrosphären sowie die Intensität und Reproduzierbarkeit des Fluoreszenzsignals.

Spezifische Anwendung von HEPES-Natriumsalz in einem Fluoreszenz-Assay-Kit für die Durchflusszytometrie

Derzeit verwenden mehrere zugelassene Durchflusszytometrie-Detektionskits HEPES Natriumsalzpuffer als Kernkomponente.

Antigenerkennungskit für Plattenepithelkarzinome (Flow-Zytometrie-Fluoreszenz-Lumineszenz-Methode):

Das mit Mikrosphären beschichtete Antikörperreagenz (A) enthält in der Zusammensetzung des Kits Mikrosphären, die mit SCCA-Antikörpern (Maus) und HEPES-Natriumsalzpuffer beschichtet sind.Das Biotin-Antikörperreagenz (B) enthält biotinylierte SCCA-Antikörper (Maus) und HEPES-NatriumsalzpufferDas Produkt muss im Dunkeln bei 2-8 °C aufbewahrt werden.°Cund hat eine Haltbarkeit von 12 Monaten.

Zytokindetektivierungskit (Flusszytometrie, Fluoreszenz-Lumineszenz-Methode):

Dieses Kit wird hauptsächlich klinisch zur Überwachung des Immunstatus und der Entzündungsreaktion des Körpers eingesetzt.Das mit Mikrosphären beschichtete Antikörperreagenzium (A) enthält sechs Arten von beschichteten Antikörpermikrosphären und einen HEPES-Natriumsalzpuffer.Die Kalibrierproben (CAL2-CAL6) und die Qualitätskontrollproben (QCL) wurden mit einer Menge von 0,05 mg/kg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer Dosis von 0,05 mg/kg in einer DosisQCH) basieren ebenfalls auf dem HEPES-Natriumsalzpuffer.

Typische Formel für HEPES Natriumsalz in Pufferlösung

In praktischen Anwendungen wird HEPES Natriumsalz häufig in Kombination mit anderen Komponenten verwendet, um ein komplettes Puffersystem zu konstruieren.Der Puffer, der für die Flusszytometrie zur Fluoreszenzdetektion verwendet wird, umfasst in der Regel einen BasispufferDer Grundpuffer umfasst einen oder mehrere Tris-Puffer, MES-Puffer, CBS-Puffer, PBS-Puffer und HEPES-Puffer.Die Konzentration der gelösten Stoffe im Grundpuffer beträgt im Allgemeinen 50-100 mM., und der pH-Wert beträgt 7,3-7.5.

In klassischen Anwendungen der Durchflusszytometrie und der Fluoreszenzdetektion sind häufige Formulierungen des HEPES-Puffers: 10mM HEPES, 150mM NaCl, 3mM EDTA, 0,05% Tween 20, pH 7.0Oder 10 mm HEPES, 136 mm NaCl, 2,7 mm KCl, 2 mm MgCl₂, 5,5 mM Glukose, 0,1% BSA, pH 7.35.

Ausgehend von den physikalisch-chemischen Eigenschaften von HEPES Natriumsalz wird in diesem Artikel systematisch seine spezifischen Anwendungsszenarien in Flusszytometrie-Fluoreszenz-Assay-Kits vorgestellt.Der nächste Artikel wird die technologischen Vorteile von HEPES-Natriumsalz in der Fluoreszenzdetektion durch Fließzytometrie aus den Dimensionen des pH-Pufferbereichs untersuchen., Metallionenchelation, optische Transparenz, chemische Trägheit und Zytotoxizität.Schlüsselparameter und Beschaffungsvorschläge für die Auswahl der Rohstoffe werden bereitgestellt, die eine Referenz für die Auswahl von Rohstoffen und die Qualitätskontrolle von Reagenzkits-Herstellungsbetrieben bietet.