HEPESナトリウム塩 (CAS番号75277-39-3),化学名 N - (2-ヒドロキシエチル) ピペラジン-N " - (2-エチル硫酸) ナトリウム塩,分子式C₈H₁N₂ノー₄HEPESナトリウム塩は,Goodのバッファファミリーに属し,pKaは25で7.5です.°CpH 6.8~8 の有効なバッファリング範囲2このバッファ範囲は,ほとんどの生理学的反応とインビトロ診断反応に必要なpH範囲を正確にカバーします.細胞培養などの分野で広く使用されているバッファシステムのコアコンポーネントになりますバイオ医薬品や診断用試料
HEPESナトリウム塩は物理化学的な利点が多々ある.金属離子への結合能力は極めて低く,マグネシウム,カルシウム,マンガンなどの二価な金属離子には結合しない.高い光学透明性低細胞毒性,Trisやリン酸塩などの伝統的なバッファング剤に優れている.温度に適した温度安定性と最小限のpH変動これらの特性により,HEPESナトリウム塩は,熒光検出を含む体外診断キットにおいて,不可替代的な位置を占めています.
フロー・フルオレッセンス・ルミネセンス・メソッドの紹介
フロー・フルオレセンスの発光検査は,近年,インビトロ診断 (IVD) の分野で急速に発展している多指数関節検出技術です.伝統的な化学発光単品検出と比較して流量細胞測定により,複数の物体を同時に検出でき,高出力の利点があります.検出プロセス中に,バッファーの安定性は,抗原抗体反応の効率を直接決定します.顕微鏡の分散状態,および?? 光信号の強度と再現性
HEPESナトリウム塩を流量細胞測定のフローレスセンスの測定キットに特異的に適用する
現在,複数の承認されたフローサイトメトリ検出キットでは,HEPESナトリウム塩バッファをコアコンポーネントとして使用しています.以下は2つの代表的な例です:
スクワム細胞がん抗原検出キット (フローサイトメトリ・フルオレスセンス・ルミネセンス方法):
キットの組成では,マイクロ球で覆われた抗体反応剤 (A) は,SCCA (マウス) 抗体とHEPESナトリウム塩バッファで覆われたマイクロ球を含む.バイオチン抗体反応剤 (B) は,バイオティニレートされたSCCA (マウス) 抗体とHEPESナトリウム塩バッファを含みます.暗闇で 2- 8 温度で保管する必要があります.°C保存期間は12ヶ月です
サイトカイン検出キット (流量細胞測定 流光発光方法):
このキットは,主に免疫状態と体の炎症反応をモニターするために臨床的に使用されます.HEPESナトリウム塩バッファは,複数の成分で使用されます:微球覆い抗体反応剤 (A) は,6種類の覆い抗体微球とHEPESナトリウム塩バッファを含みます.ビオチン抗体試料 (B) は6つのビオチニレート抗体とHEPESナトリウム塩バッファを含みます.QCH) もHEPESナトリウム塩バッファに基づいています..
緩衝溶液中のHEPESナトリウム塩の典型的な式
実用的な応用では,HEPESナトリウム塩は,完全なバッファシステムを構築するために,他の成分と併用されることが多い.流量細胞測定で使用されるバッファは,通常ベースバッファを含みます.基本バッファには,Trisバッファ,MESバッファ,CBSバッファ,PBSバッファ,およびHEPESバッファの1つまたは複数のものが含まれる.基本バッファの溶液濃度は一般的に50~100mMである.pH値は7.3〜7です5.
流量細胞測定と熒光検出の古典的な応用では,HEPESバッファの一般的な配合には,10mM HEPES,150mM NaCl,3mM EDTA,0.05% Tween 20,pH 7が含まれます.0または 10mM HEPES, 136mM NaCl, 2.7mM KCl, 2mM MgCl₂血糖5. 5mM BSA0. 1%,pH735.
この記事では,HEPESナトリウム塩の物理化学的性質からスタートし,フローサイトメトリー・フルオレッセンスの検査キットにおけるその具体的な応用シナリオを体系的に紹介する.次の記事では,PHバッファ範囲の寸法から流量細胞測定でHEPESナトリウム塩の主要な技術的利点について詳しく説明します.メタルイオンのケラレーション,光学透明性,化学的惰性,細胞毒性原材料の選択のための主要なパラメータと調達提案が提供されます.試料キット生産企業の原材料選択と品質管理のための基準を提供する.
