なぜトリス溶液は長い間放置された後に黄色になるのですか?

実験室では,前もって準備されたボトルがトリス・バッファ溶液は,しばらく保存された後,無色で透明な溶液から 淡い黄色,あるいは淡い茶色に変化します.実験者 の 多く は,このような 解決策 が 今 も 使え ます か と 疑う こと が あり ますこの記事では,Tris溶液の色が変わる理由と,実験に異なる色レベルが与える影響を分析します.

トリス溶液の変色の原因は

貯蔵後にトリス溶液が黄くなるのはトリス分子の変化によるものではありません.トリス (トリヒドロキシメチラミノメタン) は,比較的安定した化学構造を有し,従来の貯蔵条件下では自己分解または変色しない.変色の原因は溶液中の不純物に関連している.Trisは製造過程中にアルデヒドやアミンの有機不純物の微量を含んでいる可能性があります.溶液に溶けた酸素と金属離子と接触すると溶解剤は,酸化と凝縮反応をゆっくりと進行し,結合構造を持つ色の付いた物質を生成する.鉄,銅,マンガンなどの移行金属イオンが催化作用を作用する.さらに調理用水中の金属イオン含有量は,色変化の速度と程度にも影響します.離子化水または蒸留水で調製された溶液は,超純水よりも少し早く色変化する光と温度の両方が促進要因であり,直接太陽光や高温環境は酸化反応を加速することができます.

(トライス 原材料 25kg/樽)

変化する色 Trisバッファはまだ使用できますか

この質問に対する答えは,溶液の変色程度と使用状況に依存します.溶液がわずかに黄色になり,非常に淡い黄色に見えます.通常の状況下でも使用できます溶液のpH値は比較的安定し,色素の不純分量は非常に低く,観測可能な干渉を引き起こさないタンパク質電解,ヌクレイン酸電解,ウェスタン・ブロットなどの日常実験では,軽度の変色を持つTrisバッファは実験結果に有意に影響しません..しかし溶液の色が濃い黄色か茶色で 濃くなると溶液に一定量の酸化物質が蓄積していることを示しますまた,これ以上使用しないようにお勧めします.これらの色素物質は,電球化中に背景の染色を増やし,スペクトロフォトメトリック検出における吸収性干渉を引き起こす可能性があります.細胞状態に影響を与える可能性があります.

色の変化するTris溶液が使用可能かどうかを判断する方法

実験の実際の種類に基づいて単純な判断をすることができます. 電気泳用のバッファーとしてのみ使用される状況では,色を変える溶液の少量を取り,新鮮に調製されたバッファと比較して帯の透明度と背景の色に有意な差があるかどうかを観察するために試験を実行します.タンパク質浄化または染色体分析では,色素の不純物が染色体列に吸収され,分離効率に影響を与える可能性があるため,注意することが推奨されます.細胞培養媒体のため酸化製品は細胞成長に悪影響を及ぼす可能性があるため,色を変える溶液は推奨されません.実験の条件が高くなるほど溶液に堆積物やぼんやりが現れれば,重度の汚染を示し,色に関係なく廃棄すべきである.

トリス溶液の色が変わるのを防ぐ方法

変色防止は 使えるかどうか 判断するより効果的です水中の金属イオンや有機物質を減らすことができます準備後,溶液は20分間121°Cで高圧滅菌される.滅菌プロセスは,溶けた酸素や微生物の一部を除去することができる.後に保管する際に酸化反応を遅らせるのに役立ちます消毒された溶液は,光や高温を避け,密閉された容器に保管する必要があります.溶液は小さなボトルに分けられ,蓋を繰り返し開いて酸素と汚染物質を導入する可能性を減らすために,一度に1ボトル摂取することができます.冷蔵庫では化学反応の速度を効果的に減らすこともできますが,冷蔵後に溶液を再熱し,使用前にpHを再確認する必要があります.

準備および使用中の注意事項

トリス溶液の色が頻繁に変化すると,調製環境や保管条件に問題がある可能性があることを示します.配給用水の純度が要求事項を満たしているかどうかを確認する貯蔵容器が徹底的に清掃され,金属残留物がある場合長期間の使用後,微量金属を沉着させる可能性があります.ポリプロピレンまたは高密度ポリエチレン製の容器に切り替えることが推奨されます.金属イオンに敏感な研究室では,準備されたTrisバッファにEDTAのような少量のケラティングエージェントが加えられ,ケラティング溶液内の金属イオンの酸化変色速度を遅らせる.しかし,EDTA自体も特定の実験システムに影響を与える可能性があるため,追加する前に互換性が確認されなければなりません.

(トリス白色原料の粉末)

結論

トリス溶液の黄化が一般的現象であり,金属イオンによって触媒される酸化反応に関連している.軽い変色を伴う溶液は,ほとんどの日常実験で通常使用できます.調理用水の質を向上させることで,適切な貯蔵容器と条件を使用Tris 溶液の使用寿命は効果的に延長できます.

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