Pourquoi la solution Tris vire-t-elle au jaune après avoir été laissée longtemps ? Peut-elle encore être utilisée

En laboratoire, il est fréquent de rencontrer des situations où une bouteille deTris tamponla solution, après avoir été conservée pendant un certain temps, passe d'une solution incolore et transparente à une couleur jaune clair ou même brun clair.Beaucoup d'expérimentateurs hésitent à savoir si une telle solution peut encore être utilisée.Cet article analyse les raisons de la décoloration de la solution de Tris et l'impact des différents niveaux de couleur sur l'expérience.

La raison fondamentale de la décoloration de la solution de Tris

Le jaunissement de la solution de Tris après stockage n' est pas dû à des changements dans la molécule de Tris elle-même.Le Tris (trihydroxyméthylaminométhane) a une structure chimique relativement stable et ne se décompose ni ne se décolore par lui-même dans des conditions de stockage conventionnelles.La véritable cause de la décoloration est liée aux impuretés présentes dans la solution.Lorsque ces impuretés rencontrent des ions métalliques et de l'oxygène dissous dans la solutionLes ions métalliques de transition tels que le fer, le cuivre et le manganèse y jouent un rôle catalytique.En plus, la teneur en ions métalliques de l'eau utilisée pour la préparation peut également affecter la vitesse et le degré de changement de couleur.Les solutions préparées avec de l'eau désionisée ou distillée ont un taux de changement de couleur légèrement plus rapide que l'eau ultrapureLa lumière et la température sont à la fois des facteurs favorables, et la lumière directe du soleil ou des environnements à haute température peuvent accélérer la réaction d'oxydation.

(matériau de base Tris 25 kg/tambour)

Est-ce que le tampon qui change de couleur peut encore être utilisé?

La réponse à cette question dépend du degré de décoloration de la solution et du scénario d'utilisation.il peut encore être utilisé dans des circonstances normalesComme la capacité de tamponnage de Tris n'est pas affectée, la valeur du pH de la solution reste relativement stable et la teneur en impuretés colorées est très faible.qui ne causera pas d'interférence observable à la plupart des expériences classiquesPour les expériences de routine telles que l'électrophorèse des protéines, l'électrophorèse des acides nucléiques et le Western blot, le tampon Tris avec une légère décoloration n'affectera pas significativement les résultats expérimentaux..Mais si la couleur de la solution s'assombrit sensiblement, apparaissant jaune foncé ou brun, cela indique qu'une certaine quantité de produits d'oxydation s'est accumulée dans la solution,et il est recommandé de ne plus l' utiliserCes substances colorées peuvent augmenter la coloration du fond pendant l'électrophorèse, causer des interférences d'absorption dans la détection spectrophotométrique,et peut affecter l'état cellulaire dans certaines expériences cellulaires.

Comment déterminer si une solution de Tris changeant de couleur est utilisable

Le laboratoire peut faire un jugement simple basé sur le type d'expérience réel.prendre une petite quantité de solution de changement de couleur et effectuer un essai pour observer s'il y a des différences significatives de clarté de bande et de couleur de fond par rapport au tampon fraîchement préparéPour la purification des protéines ou l'analyse chromatographique, il est recommandé d'être prudent car les impuretés colorées peuvent s'adsorber sur la colonne chromatographique et affecter l'efficacité de séparation.Pour les milieux de culture cellulaire, les solutions changeant de couleur ne sont pas recommandées car les produits d' oxydation peuvent avoir des effets néfastes sur la croissance cellulaire.Le principe général est que plus la couleur est foncée, plus les exigences expérimentales sont élevées.Si des sédiments ou des turbidités apparaissent dans la solution, cela indique une contamination grave et doit être éliminé quelle que soit sa couleur.

Comment prévenir la décoloration de la solution de Tris

Prévenir la décoloration est plus efficace que de déterminer si elle peut être utilisée.l'utilisation d'eau ultrapure fraîchement préparée peut réduire la teneur en ions métalliques et en matières organiques dans l'eauAprès préparation, la solution est soumise à une stérilisation à haute pression à 121 degrés Celsius pendant 20 minutes.qui aide à ralentir les réactions d'oxydation lors du stockage ultérieur. La solution stérilisée doit être conservée dans un récipient scellé, à l'abri de la lumière et des températures élevées.la solution peut être divisée en petites bouteilles et prise une bouteille à la fois pour réduire le risque d'ouverture répétée du couvercle et d'introduction d'oxygène et de polluantsLe stockage réfrigéré peut également réduire efficacement le taux de réactions chimiques, mais la solution après réfrigération doit être réchauffée et le pH vérifié avant utilisation.

Précautions pendant la préparation et l' utilisation

Si la solution de Tris change de couleur fréquemment, cela indique qu' il peut y avoir des problèmes avec l' environnement de préparation ou les conditions de stockage.Vérifiez si la pureté de l'eau utilisée pour la distribution est conforme aux prescriptionsCertains laboratoires ont l'habitude d'utiliser des récipients en verre pour préparer et stocker des solutions de Tris.qui peuvent précipiter des traces de métaux après une utilisation prolongéePour les laboratoires sensibles aux ions métalliques, il est recommandé de passer à des récipients en polypropylène ou en polyéthylène à haute densité.une petite quantité d'agent chélatant tel que l'EDTA peut être ajoutée au tampon Tris préparé pour ralentir le taux d'oxydation et la décoloration des ions métalliques dans la solution chélatanteToutefois, il convient de noter que l'EDTA peut également affecter certains systèmes expérimentaux et que la compatibilité doit être confirmée avant d'être ajoutée.

(Poude de matière première blanche Tris)

Conclusion

Le jaunissement de la solution de Tris est un phénomène courant, qui est lié à la réaction d'oxydation catalysée par les ions métalliques.Une solution avec une légère décoloration peut encore être utilisée normalement dans la plupart des expériences de routine.En améliorant la qualité de l'eau utilisée pour la préparation, il est recommandé de l'éliminer lorsque la couleur s'assombrit de manière significative ou que des précipitations se produisent.en utilisant des conteneurs et des conditions de stockage appropriés, la durée de vie de la solution Tris peut être prolongée efficacement.

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