Hervorheben:
Tris Puffer
, 77-86-1
, Hubei Xindesheng
Warum verfärbt sich die Tris-Lösung nach langer Lagerung gelb? Kann sie noch verwendet werden?
Im Labor treten häufig Situationen auf, in denen eine Flasche mit vorbereitetem Tris-Puffer Lösung nach einer gewissen Lagerzeit von einer farblosen und transparenten Lösung zu einer hellgelben oder sogar hellbraunen Farbe wechselt. Viele Experimentatoren zögern möglicherweise, ob eine solche Lösung noch verwendet werden kann. Dieser Artikel analysiert die Gründe für die Verfärbung von Tris-Lösung und die Auswirkungen unterschiedlicher Farbintensitäten auf das Experiment.
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Produktname
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Tris (hydroxymethyl)aminomethan
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Chemische Weißes kristallines PulverTRIS-Puffer
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P
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Die Vergilbung der Tris-Lösung nach der Lagerung ist nicht auf Veränderungen des Tris-Moleküls selbst zurückzuführen. Tris (trihydroxymethylaminomethan) hat eine relativ stabile chemische Struktur und zersetzt sich unter normalen Lagerbedingungen nicht und verfärbt sich nicht von selbst. Der eigentliche Grund für die Verfärbung liegt in Verunreinigungen in der Lösung. Tris kann während des Produktionsprozesses Spuren von Aldehyd- oder Amin-organischen Verunreinigungen enthalten. Wenn diese Verunreinigungen auf Metallionen und gelösten Sauerstoff in der Lösung treffen, unterliegen sie langsamen Oxidationskondensationsreaktionen, die farbige Substanzen mit konjugierten Strukturen erzeugen. Übergangsmetallionen wie Eisen, Kupfer und Mangan spielen dabei eine katalytische Rolle. Darüber hinaus kann der Metallionengehalt im zur Zubereitung verwendeten Wasser die Geschwindigkeit und den Grad der Farbänderung beeinflussen. Lösungen, die mit deionisiertem Wasser oder destilliertem Wasser zubereitet wurden, weisen eine etwas schnellere Farbänderungsrate auf als ultrareines Wasser. Licht und Temperatur sind beides fördernde Faktoren, und direktes Sonnenlicht oder Umgebungen mit hoher Temperatur können die Oxidationsreaktion beschleunigen.ErscheinungsbildWeißes kristallines PulverCAS
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Nummer
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77-86-1Molekulare
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Formel
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Die Antwort auf diese Frage hängt vom Grad der Verfärbung der Lösung und dem Anwendungsszenario ab. Wenn die Lösung nur leicht gelb wird und sehr blassgelb erscheint, kann sie unter normalen Umständen noch verwendet werden. Da die Pufferkapazität von Tris nicht beeinträchtigt ist, bleibt der pH-Wert der Lösung relativ stabil und der Gehalt an farbigen Verunreinigungen ist sehr gering, was die meisten konventionellen Experimente nicht merklich beeinträchtigt. Für Routineexperimente wie Protein-Elektrophorese, Nukleinsäure-Elektrophorese und Western Blot hat Tris-Puffer mit leichter Verfärbung keine signifikanten Auswirkungen auf die experimentellen Ergebnisse. Wenn die Farbe der Lösung jedoch merklich dunkler wird und dunkelgelb oder braun erscheint, deutet dies darauf hin, dass sich eine gewisse Menge an Oxidationsprodukten in der Lösung angesammelt hat, und es wird empfohlen, sie nicht mehr zu verwenden. Diese farbigen Substanzen können die Hintergrundfärbung bei der Elektrophorese erhöhen, Absorptionsstörungen bei der spektrophotometrischen Detektion verursachen und den Zellzustand bei bestimmten Zellversuchen beeinträchtigen.tandard olekulares Gewicht
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121,135
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Die Antwort auf diese Frage hängt vom Grad der Verfärbung der Lösung und dem Anwendungsszenario ab. Wenn die Lösung nur leicht gelb wird und sehr blassgelb erscheint, kann sie unter normalen Umständen noch verwendet werden. Da die Pufferkapazität von Tris nicht beeinträchtigt ist, bleibt der pH-Wert der Lösung relativ stabil und der Gehalt an farbigen Verunreinigungen ist sehr gering, was die meisten konventionellen Experimente nicht merklich beeinträchtigt. Für Routineexperimente wie Protein-Elektrophorese, Nukleinsäure-Elektrophorese und Western Blot hat Tris-Puffer mit leichter Verfärbung keine signifikanten Auswirkungen auf die experimentellen Ergebnisse. Wenn die Farbe der Lösung jedoch merklich dunkler wird und dunkelgelb oder braun erscheint, deutet dies darauf hin, dass sich eine gewisse Menge an Oxidationsprodukten in der Lösung angesammelt hat, und es wird empfohlen, sie nicht mehr zu verwenden. Diese farbigen Substanzen können die Hintergrundfärbung bei der Elektrophorese erhöhen, Absorptionsstörungen bei der spektrophotometrischen Detektion verursachen und den Zellzustand bei bestimmten Zellversuchen beeinträchtigen.tandard Verpackung500g/Flasche
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Hersteller
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Hubei XindeshengDer Grund für die Verfärbung der Tris-LösungDie Vergilbung der Tris-Lösung nach der Lagerung ist nicht auf Veränderungen des Tris-Moleküls selbst zurückzuführen. Tris (trihydroxymethylaminomethan) hat eine relativ stabile chemische Struktur und zersetzt sich unter normalen Lagerbedingungen nicht und verfärbt sich nicht von selbst. Der eigentliche Grund für die Verfärbung liegt in Verunreinigungen in der Lösung. Tris kann während des Produktionsprozesses Spuren von Aldehyd- oder Amin-organischen Verunreinigungen enthalten. Wenn diese Verunreinigungen auf Metallionen und gelösten Sauerstoff in der Lösung treffen, unterliegen sie langsamen Oxidationskondensationsreaktionen, die farbige Substanzen mit konjugierten Strukturen erzeugen. Übergangsmetallionen wie Eisen, Kupfer und Mangan spielen dabei eine katalytische Rolle. Darüber hinaus kann der Metallionengehalt im zur Zubereitung verwendeten Wasser die Geschwindigkeit und den Grad der Farbänderung beeinflussen. Lösungen, die mit deionisiertem Wasser oder destilliertem Wasser zubereitet wurden, weisen eine etwas schnellere Farbänderungsrate auf als ultrareines Wasser. Licht und Temperatur sind beides fördernde Faktoren, und direktes Sonnenlicht oder Umgebungen mit hoher Temperatur können die Oxidationsreaktion beschleunigen.(Tris-Rohmaterial 25kg/Trommel)
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Kann der sich verfärbende Tris-Puffer noch verwendet werden
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Die Antwort auf diese Frage hängt vom Grad der Verfärbung der Lösung und dem Anwendungsszenario ab. Wenn die Lösung nur leicht gelb wird und sehr blassgelb erscheint, kann sie unter normalen Umständen noch verwendet werden. Da die Pufferkapazität von Tris nicht beeinträchtigt ist, bleibt der pH-Wert der Lösung relativ stabil und der Gehalt an farbigen Verunreinigungen ist sehr gering, was die meisten konventionellen Experimente nicht merklich beeinträchtigt. Für Routineexperimente wie Protein-Elektrophorese, Nukleinsäure-Elektrophorese und Western Blot hat Tris-Puffer mit leichter Verfärbung keine signifikanten Auswirkungen auf die experimentellen Ergebnisse. Wenn die Farbe der Lösung jedoch merklich dunkler wird und dunkelgelb oder braun erscheint, deutet dies darauf hin, dass sich eine gewisse Menge an Oxidationsprodukten in der Lösung angesammelt hat, und es wird empfohlen, sie nicht mehr zu verwenden. Diese farbigen Substanzen können die Hintergrundfärbung bei der Elektrophorese erhöhen, Absorptionsstörungen bei der spektrophotometrischen Detektion verursachen und den Zellzustand bei bestimmten Zellversuchen beeinträchtigen.Wie man feststellt, ob eine sich verfärbende Tris-Lösung verwendbar ist
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Wie man die Verfärbung von Tris-Lösung verhindert
Die Verhinderung von Verfärbungen ist wirksamer als die Bestimmung, ob sie verwendet werden kann. Bei der Zubereitung von Tris-Puffer kann die Verwendung von frisch zubereitetem ultrareinem Wasser den Gehalt an Metallionen und organischen Stoffen im Wasser reduzieren. Nach der Zubereitung wird die Lösung 20 Minuten lang bei 121 Grad Celsius unter Hochdruck sterilisiert. Der Sterilisationsprozess kann einige gelöste Sauerstoff- und Mikroorganismen entfernen, was dazu beiträgt, Oxidationsreaktionen während der anschließenden Lagerung zu verlangsamen. Die sterilisierte Lösung sollte in einem versiegelten Behälter gelagert werden, wobei Licht und hohe Temperaturen vermieden werden sollten. Wenn eine Langzeitlagerung erforderlich ist, kann die Lösung in kleine Flaschen aufgeteilt und einzeln entnommen werden, um die Wahrscheinlichkeit des wiederholten Öffnens des Deckels und des Eindringens von Sauerstoff und Schadstoffen zu verringern. Die Kühlung kann auch die Geschwindigkeit chemischer Reaktionen effektiv reduzieren, aber die Lösung nach der Kühlung muss vor Gebrauch erwärmt und der pH-Wert erneut überprüft werden.
Vorsichtsmaßnahmen bei der Zubereitung und Verwendung
Wenn die Tris-Lösung häufig die Farbe wechselt, deutet dies darauf hin, dass es Probleme mit der Zubereitungsumgebung oder den Lagerbedingungen geben kann. Überprüfen Sie, ob die Reinheit des für die Verteilung verwendeten Wassers den Anforderungen entspricht, ob der Lagerbehälter gründlich gereinigt ist und ob Metallrückstände vorhanden sind. Einige Labore sind daran gewöhnt, Glasbehälter zur Zubereitung und Lagerung von Tris-Lösungen zu verwenden, die nach langer Gebrauchsdauer Spurenmetalle ausfallen lassen können. Es wird empfohlen, auf Behälter aus Polypropylen oder Polyethylen hoher Dichte umzusteigen. Für Labore, die empfindlich auf Metallionen reagieren, kann eine kleine Menge eines Chelatbildners wie EDTA zum zubereiteten Tris-Puffer hinzugefügt werden, um die Oxidationsverfärbungsrate der Metallionen in der Chelatlösung zu verlangsamen. Es ist jedoch zu beachten, dass EDTA selbst auch bestimmte experimentelle Systeme beeinflussen kann und die Kompatibilität vor der Zugabe bestätigt werden muss.
(Tris weißes Rohmaterialpulver)
Schlussfolgerung
Die Vergilbung von Tris-Lösung ist ein häufiges Phänomen, das mit der durch Metallionen katalysierten Oxidationsreaktion zusammenhängt. Eine Lösung mit leichter Verfärbung kann in den meisten Routineexperimenten noch normal verwendet werden, es wird jedoch empfohlen, sie zu verwerfen, wenn die Farbe deutlich dunkler wird oder sich Niederschlag bildet. Durch die Verbesserung der Qualität des zur Zubereitung verwendeten Wassers und die Verwendung geeigneter Lagerbehälter und -bedingungen kann die Lebensdauer von Tris-Lösung effektiv verlängert werden.
Als Hersteller von Trihydroxymethylaminomethan
Hubei Xindesheng
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