Waarom wordt Tris-oplossing geel na langdurige opslag? Kan het nog steeds worden gebruikt?

Productnaam

Tris (hydroxymethyl) aminomethaan

Chemische Wit kristallijn poederTRIS-buffer

P

Het antwoord op deze vraag hangt af van de mate van verkleuring van de oplossing en het gebruiksscenario. Als de oplossing slechts lichtgeel wordt en zeer lichtgeel oogt, kan deze onder normale omstandigheden nog steeds worden gebruikt. Omdat het buffercapaciteit van Tris niet wordt beïnvloed, blijft de pH-waarde van de oplossing relatief stabiel en is het gehalte aan gekleurde onzuiverheden zeer laag, wat geen waarneembare interferentie zal veroorzaken bij de meeste conventionele experimenten. Voor routinematige experimenten zoals eiwitelektroforese, nucleïnezuurelektroforese en Western blot, zal Tris-buffer met lichte verkleuring de experimentele resultaten niet significant beïnvloeden. Maar als de kleur van de oplossing merkbaar donkerder wordt, donkergeel of bruin oogt, geeft dit aan dat er een bepaalde hoeveelheid oxidatieproducten in de oplossing is opgehoopt en wordt het aanbevolen om deze niet meer te gebruiken. Deze gekleurde stoffen kunnen achtergrondkleuring verhogen tijdens elektroforese, absorptie-interferentie veroorzaken bij spectrofotometrische detectie en kunnen de celstatus beïnvloeden in bepaalde celcultuur experimenten.UiterlijkWit kristallijn poederCAS

Nummer

77-86-1Molecuulformule

C4H11NO3

Hoe verkleuring van Tris-oplossing te voorkomenFabrikant121.135Standaard

Verpakking

Hoe verkleuring van Tris-oplossing te voorkomenFabrikantHubei XindeshengDe fundamentele reden voor de verkleuring van Tris-oplossing

De vergeling van Tris-oplossing na opslag is niet te wijten aan veranderingen in het Tris-molecuul zelf. Tris (trihydroxymethylaminomethaan) heeft een relatief stabiele chemische structuur en ontleedt of verkleurt niet vanzelf onder conventionele opslagomstandigheden. De werkelijke reden voor verkleuring is gerelateerd aan onzuiverheden in de oplossing. Tris kan sporen van aldehyde- of amine-organische onzuiverheden bevatten tijdens het productieproces. Wanneer deze onzuiverheden metaalionen en opgeloste zuurstof in de oplossing tegenkomen, ondergaan ze langzame oxidatiecondensatiereacties, waarbij gekleurde stoffen met geconjugeerde structuren worden gegenereerd. Overgangsmetaalionen zoals ijzer, koper en mangaan spelen hierin een katalytische rol. Bovendien kan het metaaliongehalte in het water dat voor de bereiding wordt gebruikt, de snelheid en mate van kleurverandering beïnvloeden. Oplossingen bereid met gedeïoniseerd water of gedestilleerd water vertonen een iets snellere kleurveranderingssnelheid dan ultrapuur water. Licht en temperatuur zijn beide bevorderende factoren, en direct zonlicht of omgevingen met hoge temperaturen kunnen de oxidatiereactie versnellen.

(Tris grondstof 25kg/drum)Kan de verkleurde Tris-buffer nog steeds worden gebruiktHet antwoord op deze vraag hangt af van de mate van verkleuring van de oplossing en het gebruiksscenario. Als de oplossing slechts lichtgeel wordt en zeer lichtgeel oogt, kan deze onder normale omstandigheden nog steeds worden gebruikt. Omdat het buffercapaciteit van Tris niet wordt beïnvloed, blijft de pH-waarde van de oplossing relatief stabiel en is het gehalte aan gekleurde onzuiverheden zeer laag, wat geen waarneembare interferentie zal veroorzaken bij de meeste conventionele experimenten. Voor routinematige experimenten zoals eiwitelektroforese, nucleïnezuurelektroforese en Western blot, zal Tris-buffer met lichte verkleuring de experimentele resultaten niet significant beïnvloeden. Maar als de kleur van de oplossing merkbaar donkerder wordt, donkergeel of bruin oogt, geeft dit aan dat er een bepaalde hoeveelheid oxidatieproducten in de oplossing is opgehoopt en wordt het aanbevolen om deze niet meer te gebruiken. Deze gekleurde stoffen kunnen achtergrondkleuring verhogen tijdens elektroforese, absorptie-interferentie veroorzaken bij spectrofotometrische detectie en kunnen de celstatus beïnvloeden in bepaalde celcultuur experimenten.Hoe te bepalen of een verkleurde Tris-oplossing bruikbaar is

Het laboratorium kan een eenvoudige beoordeling maken op basis van het werkelijke type experiment. Voor situaties waarin het alleen wordt gebruikt als elektroforesebuffer, neem een kleine hoeveelheid verkleurde oplossing en voer een proef uit om te observeren of er significante verschillen zijn in bandhelderheid en achtergrondkleur vergeleken met vers bereide buffer. Voor eiwitzuivering of chromatografische analyse wordt voorzichtigheid aanbevolen, aangezien gekleurde onzuiverheden kunnen adsorberen op de chromatografische kolom en de scheidingsefficiëntie kunnen beïnvloeden. Voor celcultuurmedia worden verkleurde oplossingen niet aanbevolen, aangezien oxidatieproducten nadelige effecten kunnen hebben op celgroei. Het algemene principe is dat hoe donkerder de kleur en hoe hoger de experimentele eisen, hoe meer deze opnieuw moet worden bereid. Als er sediment of troebelheid in de oplossing verschijnt, duidt dit op ernstige contaminatie en moet deze ongeacht de kleur worden weggegooid.

Hoe verkleuring van Tris-oplossing te voorkomenHet voorkomen van verkleuring is effectiever dan het bepalen of het kan worden gebruikt. Bij het bereiden van Tris-buffer kan het gebruik van vers bereid ultrapuur water het gehalte aan metaalionen en organische stoffen in het water verminderen. Na bereiding wordt de oplossing gedurende 20 minuten onderworpen aan hogedruksterilisatie bij 121 graden Celsius. Het sterilisatieproces kan wat opgeloste zuurstof en micro-organismen verwijderen, wat helpt om oxidatiereacties tijdens de daaropvolgende opslag te vertragen. De gesteriliseerde oplossing moet worden bewaard in een afgesloten container, uit de buurt van licht en hoge temperaturen. Indien langdurige opslag vereist is, kan de oplossing in kleine flesjes worden verdeeld en één flesje per keer worden gebruikt om de kans op herhaaldelijk openen van het deksel en het introduceren van zuurstof en verontreinigingen te verminderen. Gekoelde opslag kan ook de snelheid van chemische reacties effectief verminderen, maar de oplossing na koeling moet voor gebruik worden opgewarmd en de pH opnieuw worden gecontroleerd.