Analyse der Notwendigkeit der Sterilisation mit biologischer Pufferlösung

In biologischen Versuchen ist die Pufferlösung für jeden Versuchsplan fast ein unverzichtbares Grundreagenz.biologische PuffermittelDie Kommission ist der Ansicht, daß die Kommission in diesem Zusammenhang eine Reihe von Maßnahmen ergreift, die die Kommission in ihrem Vorschlag für eine Richtlinie zur Änderung der Verordnung (EWG) Nr.Es gibt erhebliche Unterschiede in der Notwendigkeit der Sterilisation für verschiedene Arten von Experimenten und Anwendungsszenarien..

Zweck und tatsächliche Funktion der Sterilisation

Der Hauptzweck der Sterilisationsbehandlung besteht darin, Mikroorganismen und ihre Metaboliten aus der Lösung zu entfernen.Verhinderung der Kontamination des Puffers durch Bakterien oder Pilze während der Lagerung und VerwendungFür Reservelösungen, die eine langfristige Konservierung erfordern, kann die Sterilisation ihre Haltbarkeit verlängern und die pH-Drift oder den Komponentenabbau durch mikrobielles Wachstum reduzieren.Sterilisation ist nicht für alle Szenarien anwendbar, und die Bestimmung, ob eine Sterilisation erforderlich ist, sollte auf den Anforderungen des Experiments selbst für sterile Bedingungen und die Verwendung von Pufferlösungen beruhen.

Empfohlene Sterilisationsbehandlung für die Reservolösung

Tris ist eines der am weitesten verbreiteten Puffermittel in biologischen Experimenten.Konzentrierte Lösungen mit 1.5 Mol pro Liter und pH-Wert von ca. 12. Bei Bedarf ein bestimmtes Volumen der Reservolösung entnehmen, eine angemessene Menge konzentrierter Salzsäure hinzufügen, um sich an den Ziel-pH anzupassen,und wenn er ein bestimmtes Volumen erreicht hatBei dieser Art von Reservolösung, die eine langfristige Lagerung erfordert, wird empfohlen, sie zu sterilisieren.Mikrobielle Kontamination kann eingeführt werdenWenn sich die Lagerzeit verlängert, kann der mikrobielle Stoffwechsel den pH-Wert der Lösung verändern oder Störstoffe erzeugen.Für gebrauchsfertige Pufferlösungen, die eine genaue Konzentration erfordern, konstantes Volumen und Sterilisation sind notwendige Produktionsverfahren.

Einige Experimente erfordern keine Sterilisation.

Tris-Puffer, CAPS, MOPS usw. werden häufig in Western-Blot-Experimenten verwendet.,Auch wenn die Pufferlösung sterilisiert ist, wird der Elektrophorese-Tank, die Transferplatte, dieFilterpapier und andere Ausrüstungsgegenstände, die während des Betriebs verwendet werden, sind schwierig, eine vollständige Sterilität zu erreichen.Für solche Versuche ist die Sterilisation der Pufferlösung kein notwendiger Schritt.Was mehr Aufmerksamkeit verdient, ist die Genauigkeit und Frische der Puffervorbereitung, anstatt den sterilen Zustand.

Flexible Handhabung je nach Nutzung

Die Frage, ob die Pufferlösung sterilisiert werden muss, kann aus folgenden Perspektiven beurteilt werden:wenn die Pufferlösung innerhalb kurzer Zeit nach der Zubereitung aufgebraucht wird und das Verwendungsszenario keine Zellkultur oder aseptische Operationen beinhaltetDie Sterilisation ist nicht erforderlich; wenn die Pufferlösung lange gelagert oder wiederholt verwendet werden muss, empfiehlt es sich, sie zu sterilisieren, um ihre Haltbarkeit zu verlängern.Wenn das Experiment klare Anforderungen an sterile Bedingungen hat, wie z. B. bei Zellkulturversuchen, müssen die Pufferlösung und alle Kontaktreagenzien angemessen sterilisiert werden;Bei Verwendung einer Pufferlösung für die kommerzielle Herstellung von Reagenzkits, Sterilisations- und Korrosionsschutzmaßnahmen sind Bestandteil der Qualitätskontrolle.

Auswahl der Sterilisationsmethoden

Bei Pufferlösungen, die sterilisiert werden müssen, sind unter anderem Hochdruckdampfsterilisation und Filtrationssterilisation üblich.Hochdruckdampfsterilisation eignet sich für hitzebeständige PufferlösungenNach der Sterilisation muss der pH-Wert an der Versuchstemperatur neu kalibriert werden.Die Filtrationssterilisation eignet sich für Pufferlösungen, die thermisch instabil sind oder sich bei hohen Temperaturen leicht zersetzenDie Mikroorganismen werden durch eine 0,22-Mikron-Filtermembran entfernt, was wenig Auswirkungen auf die Zusammensetzung der Pufferlösung hat.Die Wahl des Verfahrens hängt von den chemischen Eigenschaften und den Verwendungsbedingungen der Pufferlösung ab..

Ob biologische Puffer sterilisiert werden müssen, hängt von der Art des Experiments, der Verwendung und den Lagerungsanforderungen ab.Es wird empfohlen, Tris und andere Reservelösungen zu sterilisieren, um ihre Haltbarkeit zu verlängern., während Pufferlösungen, die in routinemäßigen biochemischen Experimenten wie Proteinblotting verwendet werden, keine Sterilisation erfordern.BiquineDie Nutzer sollten anhand ihrer eigenen Versuchsbedingungen entscheiden, ob sie die vorbereitete Pufferlösung sterilisieren möchten.