Анализ необходимости стерилизации биологическим буферным раствором

В биологических экспериментах буферный раствор является практически незаменимым базовым реагентом для любого экспериментального плана.биологические буферные агентыОтвет не является обобщением.Существуют значительные различия в необходимости стерилизации для различных типов экспериментов и сценариев использования..

Цель и фактическая функция стерилизации

Основной целью стерилизации является удаление микроорганизмов и их метаболитов из раствора.предотвращение загрязнения буфера бактериями или грибами во время хранения и использованияДля резервных растворов, требующих длительного хранения, стерилизация может продлить срок годности и уменьшить изменение pH или деградацию компонентов, вызванную ростом микробов.Стерилизация не применима ко всем сценариям, и определение необходимости стерилизации должно основываться на требованиях самого эксперимента к стерильным условиям и использованию буферных растворов.

Рекомендуемая стерилизация для резервного раствора

Трис является одним из наиболее широко используемых буферных агентов в биологических экспериментах.такие как концентрированные растворы с 10,5 моль на литр и pH приблизительно 12. при необходимости взять определенный объем резервного раствора, добавить соответствующее количество концентрированной соляной кислоты, чтобы приспособиться к целевому pH,и после достижения определенного объемаПри повторном использовании резервного раствора, если он не стерилизован, рекомендуется стерилизовать его.может быть введено микробное заражениеПо мере продления времени хранения микробиологический метаболизм может изменять рН раствора или производить помехи.Для коммерческих готовых к использованию буферных растворов, требующих точной концентрации, постоянный объем и стерилизация являются необходимыми производственными процессами.

Некоторые эксперименты не требуют стерилизации.

Tris буфер, CAPS, MOPS и т. д. являются широко используемыми буферными системами в экспериментах Western blot. Операционная среда для таких экспериментов обычно не входит в сферу действия стерильных операций.,Даже если буферный раствор стерилизован, резервуар для электрофореза, пластина для переноса,фильтрующая бумага и другое оборудование, используемое во время операции, трудно достичь полной стерильности.Для таких экспериментов стерилизация буферного раствора не является необходимым шагом.Что заслуживает большего внимания, так это точность и свежесть приготовления буфера, а не в стерильном состоянии.

Гибкое управление в зависимости от режима использования

Необходимость стерилизации буферного раствора можно оценить с следующих точек зрения:если буферный раствор будет использован в течение короткого периода времени после приготовления и сценарий использования не включает культуру клеток или асептические операции., стерилизация не требуется; если буферный раствор необходимо хранить в течение длительного времени или повторно использовать, рекомендуется стерилизовать его для продления срока годности;Если эксперимент имеет четкие требования к стерильным условиям, такие как эксперименты, связанные с культурой клеток, буферный раствор и все контактные реагенты должны быть стерилизованы соответствующим образом;Если буферный раствор используется для производства коммерческих наборов реагентов, стерилизация и антикоррозионные меры являются частью контроля качества.

Выбор методов стерилизации

Для буферных растворов, требующих стерилизации, распространенными методами являются стерилизация пара под высоким давлением и фильтрационная стерилизация.Стерилизация пара под высоким давлением подходит для теплостойких буферных растворовПосле стерилизации pH необходимо перекалибровывать на экспериментальной температуре.Фильтрационная стерилизация подходит для буферных растворов, которые термически нестабильны или легко разлагаются при высоких температурахМикроорганизмы удаляются через 0,22-микронную фильтрующую мембрану, что мало влияет на состав буферного раствора.Выбор метода зависит от химических свойств и требований к использованию буферного раствора..

Необходимость стерилизации биологического буфера зависит от типа эксперимента, метода использования и требований к хранению.Трис и другие резервные растворы рекомендуется стерилизовать для продления срока годности., в то время как буферные растворы, используемые в рутинных биохимических экспериментах, таких как протеинообработка, не требуют стерилизации.Бисин, HEPES, MOPS и т. д. для удовлетворения потребностей в буферизации различных экспериментальных сценариев. Пользователи должны выбрать, стерилизовать ли подготовленный буферный раствор на основе своих собственных экспериментальных условий.