Bei klinischen Blutuntersuchungen ist die Auswahl von Antikoagulanzien ein Schlüsselfaktor, der die Genauigkeit der Testergebnisse direkt beeinflusst.Verschiedene Antikoagulantien haben unterschiedliche Wirkmechanismen und Anwendungsbereiche., und eine falsche Auswahl kann zu nukleinischer Säurezerstörung, einer Pseudoverlängerung der Gerinnungszeit oder einer Messdeviation des Blutzellvolumens führen.Das Verständnis der Eigenschaften und Grenzen verschiedener Antikoagulanzien kann bei der Planungsphase der Prüfungen zu vernünftigeren Urteilen beitragen..
Warum vermeidet die Extraktion von Vollblut-Nukleinsäuren Heparin
Heparin LithiumHeparin und Heparin-Natrium sind häufig verwendete Antikoagulanzien, haben jedoch erhebliche Einschränkungen bei der Blutentnahme für die Extraktion von Nukleinsäuren.Heparin bindet an Membranproteine auf der Oberfläche der ZellmembranHeparin kann auch verschiedene Proteasomen und Komplementsysteme im Vollblut binden und aktivieren.die eine Reihe enzymatischer Effekte hervorruft, die leicht zum Abbau von Nukleinsäuren führen und die Akquisitionsrate von Nukleinsäuren verringern könnenDie Wirkung der Extraktion von Nukleinsäuren aus Heparin-antikoagulierten Vollblutproben, die bei Raumtemperatur gelagert werden, ist oft unbefriedigend.
Die Interferenz von Heparin beschränkt sich nicht nur auf die Extraktionsphase, sondern beeinflusst auch die anschließende PCR-Erkennung.Heparin kann die Aktivität der DNA-Polymerase beeinträchtigen oder die Genauigkeit der Magnesium-Ionenkonzentration im Reaktionssystem beeinträchtigen., was zu einer Verringerung der Verstärkungseffizienz oder zum Auftreten unspezifischer Bands führt.Heparin ist in Szenarien mit Nukleinsäurextraktion und Amplifikationsprüfung keine ideale Wahl.
Auswahl der Natriumcitratkonzentration bei der Gerinnungstestung
Natriumsitrat ist das Standard-Antikoagulans bei der Blutgerinnungsfunktionstestung.Obwohl man anfangs glaubte, dass beides verwendet werden könnte,Die praktische Prüfung hat gezeigt, daß die 3,8%-Konzentration von Antikoagulanzien ein größeres Risiko darstellt. 3.8% Antikoagulanzien verursachen in kalziumbedingten Gerinnungstests wie PT und APTT eher eine falsche Verlängerung, insbesondere in Fällen, in denen die Stichprobengröße unzureichend ist oder der Anteil der roten Blutkörperchen hoch ist, was zu einer relativen Verringerung des Plasmavolumens führt.Wenn das Verhältnis von Antikoagulanzien zu Blut das empfohlene Verhältnis von 1 übersteigt:9, werden höhere Antikoagulanzkonzentrationen diese Abweichung weiter verschlimmern.
In der überwiegenden Mehrheit der klinischen Szenarien ist eine Konzentration von 3,2% Natriumcitrat eine zuverlässigere Wahl.8% zeigen gewisse VorteileDiese seltene Situation kann jedoch durch Anpassung des Anteils der Antikoagulanzien gelöst werden, und es ist nicht notwendig, die für Szenarien mit geringer Wahrscheinlichkeit übliche Konzentration zu ändern.nach klinischen Prüfungen, hat die 3,2%Konzentration von Natriumcitrat eine breitere Anerkennung erlangt.
Die Wirkung von EDTA-Salz auf das Blutzellvolumen
Alle EDTA-Salze können eine Schrumpfung der Blutzellen verursachen, wodurch sich das Hämatokrit nach der Zentrifugation beeinflusst.Der Unterschied zwischen verschiedenen EDTA-Salzen spiegelt sich in ihrer Löslichkeit wider., wobei Kalium-EDTA eine höhere Löslichkeit als Natrium-EDTA aufweist, was Kalium-EDTA häufiger verwendet.
Die pH-Werte von EDTA-Natriumsalz und EDTA-Dipotassiumsalz sind relativ niedriger als die von EDTA-Tripotassiumsalz.und dieser Schwellungseffekt kann die durch osmotischen Druck verursachte Zellschrumpfung teilweise kompensierenFür die Kalibrierung elektronischer BlutzellzählerDie Verwendung von EDTA-Natriumsalz und EDTA-Dipotassiumsalz als Blutgerinnungsmittel ergibt Hämatokritwerte, die den wahren Werten näher kommen als die Verwendung von EDTA-Tripotassiumsalz.Dieser Unterschied ist in Szenarien zu beachten, in denen eine genaue Messung des durchschnittlichen Blutzellvolumens erforderlich ist.
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